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文檔簡介
1、目的:從鷹嘴豆中同步提取出異黃酮和皂苷,對其進(jìn)行分離純化及分析鑒定,在此基礎(chǔ)上驗(yàn)證其對糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠降血糖、調(diào)血脂的作用,并觀察其對機(jī)體氧化-抗氧化狀態(tài)的影響以探討其降糖、調(diào)脂的作用機(jī)理。 方法:(1)依據(jù)異黃酮和皂苷的理化性質(zhì),選擇合適的提取溶劑和提取方法,設(shè)計(jì)單因素實(shí)驗(yàn)及正交實(shí)驗(yàn),制定出同步提取CI和CS的最佳工藝,并通過對比實(shí)驗(yàn)選取有效方法對粗提物進(jìn)行脫脂、脫蛋白的初步除雜處理。(2
2、)依據(jù)異黃酮和皂苷各自的理化性質(zhì),選擇合適的吸附柱對其進(jìn)行初步分離和富集,在此基礎(chǔ)上對有機(jī)溶劑沉淀法和柱色譜法進(jìn)行對比,篩選出最佳的精制方法,以得到滿意純度的CI和CS產(chǎn)品,并從一般性質(zhì)、顏色反應(yīng)及紫外特征吸收幾個(gè)方面對其進(jìn)行分析鑒定。(3)建立理想的DtVl2模型,對CI和cs降血糖、調(diào)血脂的作用進(jìn)行驗(yàn)證,并進(jìn)一步觀察其對DM小鼠體內(nèi)氧化一抗氧化狀態(tài)的影響,在此基礎(chǔ)上探討其降糖調(diào)脂的機(jī)理。 結(jié)果:(1)以乙醇為溶劑回流浸提的方
3、式能有效地進(jìn)行CI和CS的同步提取。(2)同步提取CI和CS的最佳工藝為:70﹪7,醇、固液比:1:10、水浴溫度70℃、浸提時(shí)間3h,浸提兩次。(3)冷凍離心法和等電點(diǎn)法是對粗提物進(jìn)行脫脂、脫蛋白的理想方法。(4)H103樹脂柱和HPD-600樹脂柱能有效去除糖、鹽等水溶性雜質(zhì),有效地富集CI和CS,并達(dá)到一定的純化效果。(5)聚酰胺柱層析法優(yōu)于化學(xué)溶劑沉淀法,能較好的分離、純化CI和CS,得到純度較為滿意的CI和CS產(chǎn)品。(6)先喂
4、以高糖高脂飲食,再繼以低劑量的STZ的方法能成功建立理想的DM2模型,此模型是研究DM<,2>及其血管并發(fā)癥的理想模型。(7)CI和CS對DM小鼠有明確的降血糖和調(diào)血脂的功能,可在一定程度上改善DM小鼠“三多一少”現(xiàn)象。且CS在提高血清HDLC方面的作用尤為顯著,CI在降低血清TG方面的作用尤為突出。(8)CI和CS能增強(qiáng)DM小鼠機(jī)體抗氧化酶類活性,降低DM小鼠體內(nèi)過氧化產(chǎn)物的含量,這可能是其降血糖、調(diào)血脂的作用機(jī)制之一。 結(jié)論
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