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1、南開大學(xué)碩士學(xué)位論文灰樹花真菌疏水蛋白HGFI在畢赤酵母中的表達(dá)、純化及性質(zhì)研究姓名:馮樹人申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:喬明強(qiáng)20090601AbstractAbstractFuagalhydrophobinsareafamilyoflowmolecularweightproteins(aboutlOOaa)withspecialbiophysicalpropertiesTheyaresosurface—activetha
2、ttheyarereadytoselfassembleintoamphipathicproteinmembranesatinterfaces,changingthehydrophilicityofthecorrespondingsurfacesTheyaremoleculesofgreattheoreticalandpracticalvalueFungalhydrophobinHGFIfromtheediblemushroomCr/fo
3、lafrondosaisatypeIhydrophobinidentifiedbyourgroupHGFIhasbeenfoundtopossessbothsurface—bindingandmodifyingactivities,capableoffunctionalizingcarbonanotubes,immobilizingantibodiesandmodifyingbiomedicalmaterialsurfaceswithe
4、xcellentperformanceHowever。thelimitedresourcesofHGFIduetoGfrondosa’Slonglife—cycle,lowproductionandtriflouroaceticaciddependentextractionrestrictedthetheoreticalandpracticalresearchofthisproteinInthiswork,themassproducti
5、onofHGF1wasachievedbyconstructingayeastexpressionvectorandtransformingitintothePichiapastoriscellsHGFIexpressedbyPpastoriswerefirstlyconcentratedanddesaltedbyultrafiltrationusinghollowfiberfilmsThedesaltedrecombinantHGFI
6、(rHGFI)couldthenbeseparatedfromcontaminantproteinswithcationexchangechromatographyusingaprepackedResourceQcolumnGelfiltrationchromatographyusingSephadexG75mediumcanalsoseparatetherHGF1withidealpurityProteinquantification
7、andelectrophoreticanalysisofrHGFIestablishedcationexchangeasalloptimummetodforrHGFIpurificationWatercontactangleanalysisofsiliconizedglassandmicasurfacesmodifiedbytherHGFIsuggestedthatitsharedthesamesurfaceactivitywithna
8、tiveHGFIX—rayPhotoelectronSpectrometryanalysisofelemefatsonsiliconizedglasssurfacescoatedwithrHGFIshowedelevatedlevelofCarbonandNitrogenelements,suggestingtheexistingofaproteinmembraneonthesurfaceThisisalsogoodindication
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