COX-2基因多態(tài)性與炎癥性腸病的相關(guān)性研究.pdf

1、背景：炎癥性腸?。↖BD）包括潰瘍性結(jié)腸炎（UC）和克羅恩病（CD），是一類(lèi)病因不明的慢性腸道非特異性炎癥性疾病。其發(fā)病機(jī)制至今尚不十分清楚，大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為是由腸道細(xì)菌和環(huán)境因素作用于遺傳易感的人群,導(dǎo)致腸道粘膜免疫反應(yīng)過(guò)高所致。遺傳因素作為IBD發(fā)病過(guò)程中的一個(gè)重要因素，最早而且最有說(shuō)服力的證據(jù)來(lái)自對(duì)雙生子的研究，發(fā)現(xiàn)同卵雙生子的同病率明顯高于異卵雙生子，另外流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)IBD患者具有家族聚集現(xiàn)象,并且IBD患者的一級(jí)親屬發(fā)病率明

2、顯高于正常人群。以后發(fā)展的全基因組掃描研究及IBD易感基因的研究，均證實(shí)IBD發(fā)病具有遺傳易感性。近年來(lái)，在IBD遺傳因素這一研究領(lǐng)域取得了一些重要進(jìn)展，確定了一些易感基因。例如，1996年發(fā)現(xiàn)位于16號(hào)染色體著絲粒附近的NOD2/CARD15基因，并于2001年證實(shí)該基因是CD的第一個(gè)易感基因。Stoll等證實(shí)位于10號(hào)染色體上的DLG5基因上兩個(gè)位點(diǎn)的SNP與CD有關(guān)。加拿大的一個(gè)研究組報(bào)道了位于5號(hào)染色體上的OCTN基因與CD相關(guān)

3、。2006年，美國(guó)的IBD多中心協(xié)作研究顯示一種編碼促炎癥細(xì)胞因子白介素-23(IL-23)亞單位的基因，似乎可影響炎癥性腸病的易感性，再次發(fā)現(xiàn)了IBD的易感基因。由此可見(jiàn)，IBD是一種復(fù)雜的多基因遺傳易感性疾病。通過(guò)對(duì)該病遺傳機(jī)制的研究，可確定或發(fā)現(xiàn)IBD易感基因或致病基因，對(duì)該病的基因治療、遺傳咨詢(xún)以及易感人群的合理預(yù)防起到重要作用。
　　既往研究顯示NOD2/CARD15基因、DLG5基因及OCTN基因多態(tài)性與歐洲人群IBD

4、發(fā)病相關(guān)。日本和香港的研究顯示NOD2/CARD15基因常見(jiàn)的SNP位點(diǎn)在亞洲IBD人群中沒(méi)有多態(tài)性，我國(guó)人群的小樣本研究也證實(shí)NOD2/CARD15在中國(guó)人群無(wú)多態(tài)性。日本人群遺傳學(xué)研究顯示DLG5、OCTN與日本人群CD無(wú)顯著相關(guān)，我們實(shí)驗(yàn)室的研究發(fā)現(xiàn)DLG5、OCTN與IBD無(wú)相關(guān)性，由此可見(jiàn)，遺傳存在有很大的異質(zhì)性，那么也就必然存在一個(gè)或者一些基因的突變與我國(guó)IBD人群相關(guān)。因此，尋找和鑒定與我國(guó)IBD人群相關(guān)的基因成為目前IB

5、D研究的一個(gè)熱點(diǎn)。調(diào)節(jié)炎癥過(guò)程的關(guān)鍵性分子如環(huán)氧合酶（COXs）是針對(duì)IBD易感變異的一個(gè)重要候選基因。COX-2基因的變異能夠改變酶的功能從而影響個(gè)體對(duì)炎癥的反應(yīng)。環(huán)氧合酶-2（COX-2）作為COX的一種重要形式表達(dá)于IBD患者的腸道上皮細(xì)胞和單核細(xì)胞，當(dāng)受到炎癥細(xì)胞因子如IL-1誘導(dǎo)后產(chǎn)生。COX-2是產(chǎn)生前列腺素的關(guān)鍵限制酶之一。前列腺素在胃腸道創(chuàng)傷愈合的過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。非甾體消炎藥抑制COX-2的轉(zhuǎn)錄和活性，不但加重UC的

6、癥狀，甚至可以出現(xiàn)疾病活動(dòng)的增加。因此，多態(tài)性可能通過(guò)改變炎癥細(xì)胞前列腺素的釋放從而引起IBD的易感性。為了驗(yàn)證這一假說(shuō)，我們?cè)O(shè)計(jì)了本試驗(yàn)。
　　目的：檢測(cè)我國(guó)漢族人群COX-2基因啟動(dòng)子區(qū)-1195G/A，-1290A/G和3′非編碼區(qū)的8473C/T位點(diǎn)的遺傳多態(tài)性及其與IBD可能的相關(guān)性。
　　方法：采用PCR-RFLP及DNA序列測(cè)定技術(shù)，對(duì)291例潰瘍性結(jié)腸炎、66例克羅恩病以及286名健康對(duì)照的COX-2基因（-

7、1195G/A，-1290A/G與-8473C/T）的遺傳多態(tài)性進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)使用SAS軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和單倍體分析。
　　結(jié)果：COX-2基因（-1195G/A，-1290A/G與-8473C/T）在我國(guó)人群中存在遺傳多態(tài)性，①-1195G/A位點(diǎn)在UC患者中的AA、AG和GG這三個(gè)基因型頻率分別為27.2﹪,53.9﹪,18.9﹪，CD患者中這三個(gè)基因型頻率分別為13.6﹪,65.2﹪,21.2﹪，健康對(duì)照者中分別為26.

8、2﹪,51.4﹪,22.4﹪。②-1290A/G位點(diǎn)的AA、AG和GG在UC中分別為82.8﹪,17.2﹪,0﹪，CD中分別為86.4﹪,13.6﹪,0﹪，健康對(duì)照組分別為86.4﹪,13.6﹪,0﹪。③-8473T/C位點(diǎn)的TT、TC和CC在UC中分別為58.8﹪,36.7﹪,4.5﹪，CD中分別為64.3﹪,30.3﹪,1.5﹪,健康對(duì)照組分別為64.3﹪,33.9﹪,1.8﹪,但這三個(gè)位點(diǎn)各自的遺傳多態(tài)性與IBD的發(fā)病無(wú)相關(guān)性。對(duì)

9、-1195G/A和-8473C/T進(jìn)行單倍體分析，發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)位點(diǎn)同時(shí)突變與IBD亦沒(méi)有相關(guān)性。
　　結(jié)論：本研究發(fā)現(xiàn)COX-2（-1195G/A，-1290A/G與-8473C/T）這三個(gè)位點(diǎn)存在有基因多態(tài)性，但是其多態(tài)性與IBD之間沒(méi)有關(guān)系，并且-1195G/A和-8473C/T這兩個(gè)位點(diǎn)同時(shí)突變與漢族IBD亦不存在相關(guān)性。自從2001年Hugot等發(fā)現(xiàn)并證實(shí)CD的第一個(gè)易感基因CARD15（NOD2）以來(lái)，尋找炎癥性腸病的遺傳