莫匹羅星的菌種選育與發(fā)酵工藝的研究.pdf

1、莫匹羅星由熒光假單孢菌浸沒發(fā)酵后產(chǎn)生，是一種局部外用抗生素，抗葡萄球菌，鏈球菌和部分革蘭陰性菌，同時(shí)與其它抗生素?zé)o交叉耐藥性，具有簡單易用，經(jīng)濟(jì)便宜和副反應(yīng)少的優(yōu)點(diǎn)。
　　 本文以實(shí)驗(yàn)室保藏的熒光假單胞菌SIPI-A.1033為出發(fā)菌進(jìn)行菌種選育。通過自然分離，得到高產(chǎn)菌株SIPI-A.1034；將其該菌株在最佳誘變紫外劑量50s下進(jìn)行第一次紫外誘變，得到高產(chǎn)菌株SIPI-A.1035；接著將該菌株再進(jìn)行誘變，最終得到高產(chǎn)穩(wěn)定菌

2、株SIPI-A.1036，其發(fā)酵水平比出發(fā)菌株SIPI-A.1033提高243％。
　　 進(jìn)行了熒光假單胞菌SIPI-A.1036發(fā)酵工藝的優(yōu)化。優(yōu)化后的斜面培養(yǎng)基配方(g/L)：蛋白胨10.0，牛肉膏3.0，NaCl5.0，瓊脂20.0，pH7.4；種子培養(yǎng)基配方(g/L)：進(jìn)口酵母粉5.0，進(jìn)口蛋白胨10.0，NaCl5.0，pH7.4；發(fā)酵培養(yǎng)基配方(g/L)：葡萄糖10.0，甘油50.0，冷榨黃豆粉20.0，花生粕粉10

3、.0，玉米油10.0，(NH4)2SO40.5，NH4Cl0.5，亮氨酸1.0，NaCl5.0，玉米漿5.0，CaCO35.0。優(yōu)化后的斜面培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度為25℃，培養(yǎng)時(shí)間為4d；種子培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度為25℃，培養(yǎng)時(shí)間為24h；發(fā)酵培養(yǎng)條件：初始pH為6.8，溫度為25℃，接種量為10％，裝料量為30mL，搖床轉(zhuǎn)速為240rpm，培養(yǎng)周期為60h。熒光假單胞菌SIPI-A.1036在優(yōu)化后的條件下進(jìn)行搖瓶發(fā)酵，其發(fā)酵水平提高75％

4、。
　　 將熒光假單胞菌SIPI-A.1036用優(yōu)化后的培養(yǎng)基于10L玻璃發(fā)酵罐中培養(yǎng)，考察pH、菌體生長和發(fā)酵水平之間的關(guān)系。結(jié)果顯示：發(fā)酵至6h時(shí)，菌體開始進(jìn)入對數(shù)生長期，此時(shí)開始伴隨大量的莫匹羅星合成；發(fā)酵至24h時(shí)，菌濃達(dá)到最高，同時(shí)莫匹羅星的合成速度開始下降；發(fā)酵至24h后，菌體開始進(jìn)入衰退期，但莫匹羅星的產(chǎn)量仍有少量增加；發(fā)酵至70h時(shí)，莫匹羅星的產(chǎn)量達(dá)到最高，因此，確定在實(shí)驗(yàn)室條件下的放罐時(shí)間為70h，而搖瓶發(fā)酵周