基于異鼠李素為雜交指示劑的電化學(xué)DNA生物傳感器的研究.pdf

1、DNA電化學(xué)生物傳感器是近幾年迅速發(fā)展起來的一種全新的生物傳感器，它是進(jìn)行核酸結(jié)構(gòu)分析和檢測的重要手段之一，其特點是測定快速、簡便、靈敏、價廉。 DNA電化學(xué)生物傳感器研制的關(guān)鍵技術(shù)之一是高靈敏度雜交指示劑的篩選。本論文以電化學(xué)和紫外.可見光譜方法為主要研究手段，對具有抗癌、抗菌活性的黃酮類化合物異鼠李素電化學(xué)性質(zhì)及與鮭魚精DNA的相互作用機(jī)理進(jìn)行了研究，篩選出異鼠李素作為高靈敏度、高特異性的雜交指示劑，用于檢測急性早幼粒細(xì)胞白

2、血病PML-RARα融合基因。 實驗結(jié)果表明，黃酮類小分子異鼠李素在優(yōu)化的條件下以嵌插方式結(jié)合到dsDNA雙螺旋堿基對中。由電化學(xué)研究結(jié)果可以看出，異鼠李素與dsDNA之間形成了一種非電活性的超分子化合物而導(dǎo)致峰電流減小。紫外-可見光譜顯示dsDNA的加入導(dǎo)致最大吸收峰減色并伴有紅移，此現(xiàn)象證實異鼠李素與鮭魚精dsDNA發(fā)生嵌插結(jié)合。由電化學(xué)動力學(xué)參數(shù)結(jié)合率和結(jié)合常數(shù)的測定可知，異鼠李素與DNA形成2:1復(fù)合物，結(jié)合常數(shù)為1.0

3、3×105L/mol。 以異鼠李素為雜交指示劑，選用共價鍵合法制備了DNA電化學(xué)傳感器，該傳感器具有高特異性、高靈敏度、較低檢測限。當(dāng)互補(bǔ)鏈DNA濃度在2.0×10-5～1.2×10-7mol/L范圍內(nèi)，峰電流與其濃度呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為Ip(μA)=0.2378C(μM)+2.269，相關(guān)系數(shù)r=0.9973，檢出限為1.5×10-9 mol/L(S/N=3)。 本文首次研制的基于異鼠李素為新型雜交指示劑的