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文檔簡(jiǎn)介
1、DNA電化學(xué)生物傳感器是近幾年迅速發(fā)展起來(lái)的一種全新的生物傳感器,它是進(jìn)行核酸結(jié)構(gòu)分析和檢測(cè)的重要手段之一,其特點(diǎn)是測(cè)定快速、簡(jiǎn)便、靈敏、價(jià)廉。 DNA電化學(xué)生物傳感器研制的關(guān)鍵技術(shù)之一是高靈敏度雜交指示劑的篩選。本論文以電化學(xué)和紫外.可見(jiàn)光譜方法為主要研究手段,對(duì)具有抗癌、抗菌活性的黃酮類(lèi)化合物異鼠李素電化學(xué)性質(zhì)及與鮭魚(yú)精DNA的相互作用機(jī)理進(jìn)行了研究,篩選出異鼠李素作為高靈敏度、高特異性的雜交指示劑,用于檢測(cè)急性早幼粒細(xì)胞白
2、血病PML-RARα融合基因。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,黃酮類(lèi)小分子異鼠李素在優(yōu)化的條件下以嵌插方式結(jié)合到dsDNA雙螺旋堿基對(duì)中。由電化學(xué)研究結(jié)果可以看出,異鼠李素與dsDNA之間形成了一種非電活性的超分子化合物而導(dǎo)致峰電流減小。紫外-可見(jiàn)光譜顯示dsDNA的加入導(dǎo)致最大吸收峰減色并伴有紅移,此現(xiàn)象證實(shí)異鼠李素與鮭魚(yú)精dsDNA發(fā)生嵌插結(jié)合。由電化學(xué)動(dòng)力學(xué)參數(shù)結(jié)合率和結(jié)合常數(shù)的測(cè)定可知,異鼠李素與DNA形成2:1復(fù)合物,結(jié)合常數(shù)為1.0
3、3×105L/mol。 以異鼠李素為雜交指示劑,選用共價(jià)鍵合法制備了DNA電化學(xué)傳感器,該傳感器具有高特異性、高靈敏度、較低檢測(cè)限。當(dāng)互補(bǔ)鏈DNA濃度在2.0×10-5~1.2×10-7mol/L范圍內(nèi),峰電流與其濃度呈良好的線性關(guān)系,線性回歸方程為Ip(μA)=0.2378C(μM)+2.269,相關(guān)系數(shù)r=0.9973,檢出限為1.5×10-9 mol/L(S/N=3)。 本文首次研制的基于異鼠李素為新型雜交指示劑的
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