左旋咪唑有機(jī)酸鹽的合成、免疫學(xué)評價及其凍干制劑的初步研究.pdf

1、在藥物結(jié)構(gòu)化學(xué)修飾方法中,根據(jù)結(jié)構(gòu)拼合原理,成鹽反應(yīng)是一類比較常見的方法。用這種方法修飾后的藥物,水溶性和苦味能夠得到改善,可增加療效或降低毒副作用,發(fā)揮藥物的配伍作用,還可增強(qiáng)藥物的穩(wěn)定性,成鹽后更便于拓展制劑制備和給藥途徑。本課題基于對免疫增強(qiáng)藥左旋咪唑結(jié)構(gòu)和構(gòu)效關(guān)系的分析,利用其叔氮雜環(huán)對質(zhì)子有一定的吸引力,可與有機(jī)酸的-H通過離子方式相結(jié)合成鹽,從而尋找具有優(yōu)良免疫增強(qiáng)功能且毒性較低的藥物。
　　我們選擇了酸性免疫增強(qiáng)藥(

2、L-抗壞血酸和阿魏酸)及其他三種常用有機(jī)酸(D-酒石酸、L-乳酸、檸檬酸)進(jìn)行左旋咪唑的成鹽反應(yīng),采用溶劑沉淀法首次得到五種左旋咪唑有機(jī)酸鹽類新化合物。此種合成工藝簡單易行,質(zhì)量可控及成本較低。探索合成后的左旋咪唑有機(jī)酸鹽藥效是否發(fā)生增強(qiáng),進(jìn)行藥效學(xué)篩選,同時將篩選出的藥物加工成凍干粉針劑,初步確定了實驗室規(guī)模樣品的生產(chǎn)工藝,并建立相應(yīng)的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),進(jìn)行配伍穩(wěn)定性實驗。
　　本文通過以下幾個方面進(jìn)行研究:(1)產(chǎn)物的合成及表征:

3、確定了左旋咪唑有機(jī)酸鹽的合成步驟,通過對合成產(chǎn)物的性狀研究(外觀性狀、溶解性、熔點、比旋度、pH值、水解反應(yīng))、結(jié)構(gòu)表征(TLC、元素分析、UV-Vis、FTIR、ESI-MS、摩爾電導(dǎo)率、DSC-TG)等試驗結(jié)果綜合分析。結(jié)果如下:左旋咪唑有機(jī)酸鹽合成工藝簡單、質(zhì)量可控及可適合大規(guī)模生產(chǎn),經(jīng)結(jié)構(gòu)初步驗證均說明已合成左旋咪唑有機(jī)酸鹽,而獲得的此鹽往往會改變其熔點,溶解性等理化性質(zhì)。五種有機(jī)酸鹽較左旋咪唑具有良好的水溶性,克服了左旋咪唑難

4、溶于水的缺點,更便于保存及使用。所確定的物理化學(xué)性質(zhì)為設(shè)計制劑處方、確定生產(chǎn)工藝條件提供了指導(dǎo)和依據(jù)。(2)免疫藥理學(xué)實驗初步研究:以環(huán)磷酰胺(CTX)所致免疫功能低下模型小鼠為試驗對象,對左旋咪唑有機(jī)酸鹽進(jìn)行了免疫藥理學(xué)初步實驗。觀察測定合成藥物對小鼠免疫器官指數(shù)和血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量等實驗指標(biāo)的影響,驗證其免疫增強(qiáng)效果,并進(jìn)行比較,為調(diào)節(jié)動物免疫狀態(tài)和改善機(jī)體防御能力提供試驗依據(jù)。此外,還進(jìn)行了體外溶血性試驗。結(jié)

5、合這些試驗結(jié)果,經(jīng)過初步篩選,以左旋咪唑阿魏酸鹽療效較好,顯示具有比鹽酸左旋咪唑強(qiáng)的藥理活性,可能是由于協(xié)同作用所致,且由于其良好的水溶性和適宜的酸度,可供注射用,將進(jìn)一步擬制備成粉針劑。(3)左旋咪唑阿魏酸鹽凍干粉針的工藝考察及質(zhì)量控制研究:通過考察賦形劑、pH、抗氧化劑、除菌方式及活性炭用量選擇等因素確定了凍干原液的處方及制備工藝。最佳處方以選用8％的甘露醇作為賦形劑,0.1%的硫代硫酸鈉作為抗氧劑,得到的制劑成型結(jié)構(gòu)良好、穩(wěn)定。根

6、據(jù)凍干制劑生產(chǎn)工藝流程,采用電阻法測定了凍干原液的低共熔點和共晶點,并對冷凍干燥預(yù)凍速度、預(yù)凍時間及干燥時間等關(guān)鍵工藝進(jìn)行研究,繪制出凍干曲線。確定最優(yōu)工藝為預(yù)凍溫度(-35℃,4h)、速凍、升華干燥(-22℃,12h)、解析干燥(30℃,6h)。將連續(xù)生產(chǎn)的三批樣品進(jìn)行質(zhì)量分析,并行質(zhì)量控制研究:外觀性狀、鑒別、復(fù)溶性、PH、澄明度、熱原、無菌、可見異物、裝量差異及水分含量均符合藥典有關(guān)注射劑的質(zhì)量要求;采用紫外分光光度法進(jìn)行含量檢測