藥用菌桑黃代謝黃酮的調(diào)控研究.pdf

1、桑黃是一種珍稀的藥用真菌,其次級代謝產(chǎn)物黃酮類化合物具有極高的藥用價值。本研究擬利用多尺度手段提高桑黃黃酮的代謝產(chǎn)量,首先用響應面法對桑黃發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化,同時對發(fā)酵過程進行了優(yōu)化,在此基礎上建立了兩相培養(yǎng)新型發(fā)酵工藝,最后考察了三種代謝前體和兩種非生物誘導劑對代謝過程的影響。
　　 用Plackett-Burman設計和響應面法對桑黃產(chǎn)黃酮發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化,得到最終配方為:葡萄糖20.00 g/L,麥芽糖20.00 g

2、/L,甘露醇20.00 g/L,玉米漿粉9.70 g/L,酵母粉8.74 g/L,氯化鈉5.00 g/L,硫酸亞鐵0.50 g/L,硫酸銅0.05g/L,維生素Bl1.50 g/L。使用優(yōu)化后的培養(yǎng)基,黃酮產(chǎn)量達1532.83μg/ml。
　　 對桑黃發(fā)酵過程進行了優(yōu)化,結果為:pH6.0;培養(yǎng)溫度30℃;初始裝液量250 ml搖瓶裝100 ml培養(yǎng)基;搖床轉速150 rpm;接種量10％;種齡8-9 d。建立了一種新型發(fā)酵工藝

3、即兩相培養(yǎng)法,選用了一種大孔吸附樹脂在桑黃發(fā)酵過程中對黃酮化合物進行選擇性吸附,然后用洗脫劑將黃酮洗脫出來,最終黃酮產(chǎn)量可以達到2174.35μg/ml。
　　 在桑黃黃酮代謝調(diào)控研究中考察了三種代謝前體(苯丙氨酸、肉桂酸和乙酸鈉)和兩種非生物誘導劑(硝酸銀和谷胱甘肽)對代謝過程的影響。補加一定濃度代謝前體和非生物誘導劑對黃酮的生物合成有一定促進作用,其作用效果與添加終濃度和添加時間有關。兩種非生物誘導劑協(xié)同作用時黃酮產(chǎn)量是對照