遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物的化學(xué)成分及神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用研究.pdf

1、本論文對遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物的制備工藝,質(zhì)量分析方法及神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)的體外活性進(jìn)行了研究,為遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物開發(fā)抗老年性癡呆的藥物提供了科學(xué)依據(jù)。
　　 以pH值、溫度和時間作為考察因素,細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷作為考察指標(biāo),采用TLC和HPLC作為檢測方法,對遠(yuǎn)志皂苷堿水解的參數(shù)進(jìn)行了研究,結(jié)果表明pH=14,溫度100℃,水解4h為最佳水解參數(shù)。堿水解溶液以大孔樹脂柱層吸,先以蒸餾水洗脫除去雜質(zhì),再以95％乙醇洗脫,即得遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物

2、。
　　 通過各種色譜技術(shù)從遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物中分離得到5個單體化合物,綜合利用其理化性質(zhì)和波譜特征(ESI-MS、1H-NMR和13C-NMR)鑒定出這些化合物的結(jié)構(gòu),分別為細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷(tenuifolin)、黃花倒水連皂苷A(fallaxsaponin A)、3,4,5-三甲氧基肉桂酸(3,4,5-trimethoxycinnamic acid,TMCA)、對甲氧基肉桂酸(p-methoxycinnamic acid,PM

3、CA)和肉桂酸(cinnamic acid,CA)。
　　 以tenuifolin、fallaxsaponin、TMCA和PMCA為對照品,采用HPLC法,通過線性范圍、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和加樣回收率等方法學(xué)考察,對三批遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物的含量進(jìn)行了測定,結(jié)果為tenuifolin14.9％,fallaxsaponin19.7％,TMCA24.7％,PMCA7.7％.
　　 采用SH-SYSY和PC12細(xì)胞株,通過H

4、2O2、Aβ25-35、皮質(zhì)酮和谷氨酸4個損傷模型,對遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物、遠(yuǎn)志總皂苷、遠(yuǎn)志寡糖酯、tenuifolin、fallaxsaponin、TMCA、PMCA和CA共8個樣品進(jìn)行了體外活性篩選。結(jié)果表明:
　　 對于正常SH-SY5Y和PC12細(xì)胞株,遠(yuǎn)志總皂苷、遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物、tenuifolin和fallaxsaponin表現(xiàn)出促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用；
　　 對H2O2損傷的SH-SY5Y細(xì)胞株,遠(yuǎn)志總皂苷、

5、遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物、tenuifolin和fallaxsaponin對細(xì)胞具有保護(hù)作用；
　　 對Aβ25-35損傷的PC12細(xì)胞株,遠(yuǎn)志總皂苷和遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物對細(xì)胞具有保護(hù)作用；
　　 對皮質(zhì)酮損傷的PC12細(xì)胞株,遠(yuǎn)志總皂苷和遠(yuǎn)志寡糖酯對細(xì)胞具有保護(hù)作用；
　　 對谷氨酸損傷的PC12細(xì)胞株,遠(yuǎn)志總皂苷、遠(yuǎn)志皂苷堿水解產(chǎn)物、tenuifolin和fallaxsaponin對細(xì)胞具有保護(hù)作用。