2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  探討B(tài)RCC36蛋白在慢性壓力負荷誘導的小鼠心肌肥大和纖維化中的作用及其可能作用機制。
  方法:
  1)利用商業(yè)服務構建心臟特異性過表達BRCC36的轉基因小鼠(a-MHC-BRCC36),并進行鑒定。
  2)轉基因動物完成后,通過在右無名動脈和左側頸總動脈之間部分縮窄主動脈弓(TAC)而誘導形成慢性壓力負荷模型,將制好的模型分為四組:野生型假手術組、野生型主動脈縮窄組、轉基因型假手術組、轉基因

2、型主動脈縮窄組。
  3)模型建立8周后,檢測心肌肥厚程度;將心肌樣本做蘇木素-伊紅染色以及天狼星紅染色;采用實時定量聚合酶鏈反應(Real-time PCR)方法檢測細胞外基質(zhì)結締組織生長因子(connective tissue growth factor,CTGF)、骨膜蛋白(Periostin)表達變化;Western blot檢測p-smad3、γ-H2AX、Rad51蛋白的變化情況。
  結果:
  1)通過

3、基因鑒定、western blot、Real-time RT-PCR檢測證實在基礎狀態(tài)下BRCC36轉基因小鼠心臟組織中BRCC36蛋白表達較野生型小鼠明顯升高。
  2)在野生型小鼠,TAC手術組相對于假手術組在心臟重量指數(shù)、左心室重量指數(shù)、心肌細胞直徑均增加,而在BRCC36心臟過表達的轉基因的小鼠組,TAC誘導的心肌肥厚較野生型小鼠比較明顯減輕。
  3)天狼星紅染色結果顯示:天狼星紅染色可見野生型小鼠組TAC手術組血

4、管周圍以及心肌間質(zhì)膠原沉積明顯多于假手術組,而BRCC36轉基因小鼠組TAC誘導的心肌纖維化程度較野生型小鼠組明顯減輕。
  4)采用實時定量聚合酶鏈反應(Real-time PCR)檢測結果顯示:野生型小鼠TAC手術組相對于假手術組心肌組織內(nèi)CTGF、Periostin mRNA的表達明顯升高(P<0.05),而BRCC36轉基因的小鼠組,TAC誘導的上述細胞外基質(zhì)分子表達水平低于野生型小鼠TAC手術組(P<0.05)。

5、  5) Western blot分析結果顯示,在野生型小鼠,TAC手術組相對于假手術組心肌組織內(nèi)p-smad3的水平顯著升高,同時伴有γ-H2AX及Rad51的表達明顯升高。與野生型TAC比較,轉基因小鼠TAC術后心肌組織內(nèi)smad3的活化得到明顯抑制,同時顯著降低γ-H2AX蛋白表達水平,同時顯著增加Rad51蛋白表達(P<0.05)。
  結論:
  心肌特異性過表達BRCC36可顯著改善慢性壓力負荷誘導的心肌肥厚及纖

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