Rab27AmRNA與人乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力相關(guān)性的體內(nèi)外研究.pdf

1、目的：檢測(cè)人乳腺癌細(xì)胞中Rab27A的定位、表達(dá)情況，在體內(nèi)外研究Rab27A與乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力相關(guān)性。 方法： 1、采用SYBR GREEN法實(shí)時(shí)半定量RT-PCR技術(shù)，檢測(cè)Rab27A在四種人乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435和MDA-MB-435HM中的mRNA，應(yīng)用Western-blot檢測(cè)Rab27AmRNA在四種人乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-

2、435和MDA-MB-435HM中的蛋白表達(dá)。 2、應(yīng)用免疫熒光（immunofluorescence）及激光共聚焦(confocal)掃描成像技術(shù)顯示Rab27A蛋白在乳腺癌細(xì)胞中的定位。3、裸鼠乳房脂肪墊(mammary fat pad，MFP)接種人乳腺癌細(xì)胞，探討Rab27A過(guò)表達(dá)對(duì)裸鼠原位腫瘤生長(zhǎng)及肺轉(zhuǎn)移的影響。 結(jié)果： 1、Rab27A mRNA及蛋白在人乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MDA-MB-231、M

3、DA-MB-435及MDA-MB-435HM中的表達(dá)水平隨細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的增強(qiáng)而升高。 2、在人乳腺癌細(xì)胞MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-435中，Rab27A彌散性分布于細(xì)胞漿中，而在后兩者中又可見(jiàn)Rab27A蛋白在核周凝聚。 3、Rab27A高表達(dá)細(xì)胞克隆組裸鼠肺轉(zhuǎn)移率增高，MDA-MB-231組由10％增加到50％(P<0.01)，MDA-MB-435組由60％增加到90％（P<0.05），平均每