滋補脾陰方藥抗谷氨酸致神經(jīng)元損傷中SNK-SPAR途徑機制研究.pdf

1、目的：阿爾茨海默病(Alzheimer'sdisease，AD)是一種以進行性癡呆為主要特征的神經(jīng)退行性疾病，是65歲以上人群的第四大死因。“緩慢的或間接的興奮毒”(sloworindirectexcitotoxicity)機制在AD的發(fā)病機理中扮演了重要角色，盡管這一機制也許是其它如神經(jīng)化學(xué)、遺傳、代謝等改變的繼發(fā)現(xiàn)象，但是其在AD的發(fā)展中是基本的病理基礎(chǔ)。本課題目的在于探討谷氨酸(Glutamine，Glu)致原代海馬神經(jīng)元損傷中，

2、興奮毒機制與SNK-SPAR途徑的關(guān)系，進一步探討ZBPY方藥神經(jīng)保護作用分子機制及其與樹突棘形態(tài)調(diào)節(jié)之間的相關(guān)性。 方法：以血清藥理學(xué)方法獲得含有ZBPY方藥有效成分的含藥血1清。對第12天成熟原代培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元用終濃度10μM的Glu進行損傷，實驗中設(shè)立ZBPY方藥含藥血清預(yù)處理組進行預(yù)處理。通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測Glu誘導(dǎo)及藥物血清保護后突觸后相關(guān)蛋白或受體SPAR、SNK、PSD-95、NR1

3、、NR2A、NR2BmRNA表達的變化。 結(jié)果：1.終濃度為10μM的Glu刺激3h后有效誘導(dǎo)了SNK在原代海馬神經(jīng)元中mRNA表達的增高；SPAR和PSD-95mRNA表達下調(diào)；同時NMDA受體各亞基NR1、NR2A、NR2BmRNA表達的變化呈上調(diào)趨勢。2.ZBPY方藥含藥血清預(yù)處理對SNKmRNA表達有顯著下調(diào)作用，并具有濃度依賴性，隨著中藥血清濃度的增高下調(diào)趨勢更加明顯。同時含藥血清預(yù)處理后，SPARmRNA表達有上升趨

4、勢；對下調(diào)的PSD-95mRNA表達具有顯著上調(diào)作用；對NR1、NR2A、NR2BmRNA表達均有不同程度下調(diào)。 結(jié)論：1.ZBPY方藥含藥血清預(yù)處理給藥有顯著的抗Glu興奮毒性的作用；2.ZBPY方藥抗Glu興奮毒性作用機制可能與抑制SNK-SPAR途徑信號傳遞有關(guān)，ZBPY方藥具有保護和維持樹突棘正常形態(tài)結(jié)構(gòu)的作用；3.ZBPY方藥抑制SNK-SPAR途徑信號傳遞與調(diào)控NMDA受體亞基mRNA表達變化，即選擇性抑制NMDA受