PSMA及其新型變異體PSMA5在前列腺癌診斷中的應用.pdf

1、本文擬建立一種可以定量檢測PSMA及其變異體PSMA5的實時熒光定量PCR(real-timefluorescentquantitativePCR，real-timeFQ-PCR)的方法，檢測PSMA及其變異體在不同前列腺疾病中的表達差異，并對其臨床意義進行初步探討，為深入研究前列腺癌的新型、特異、敏感的前列腺癌的診斷標志物提供新的思路和理論依據(jù)。探索PSMA及其變異體在前列腺癌臨床診斷中的臨床應用。 研究材料與方法：從泌尿系腫

2、瘤細胞株和其它腫瘤細胞標準株、前列腺癌組織、前列腺增生組織、前列腺正常組織及前列腺癌、前列腺增生患者外周血單個核細胞和血漿中提取總的RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。根據(jù)PSMA及其變異體PSMA5的共同序列設計一對通用引物Ptotal，再針對PSMA及PSMA5變異體設計各自特異引物，分別用Pwild和P5表示。然后用這三對引物對以上所收集的標本和材料做實時熒光定量PCR分析。比較PSMA及PSMA5在不同組織中以及不同前列腺疾病中的表達情

3、況。 研究結(jié)果與討論：采用自行設計的三對引物Ptotal、Pwild及P5在前列腺癌LNCap細胞株上用實時熒光定量PCR方法可以擴增出特異的產(chǎn)物。并對不同的腫瘤細胞株、不同的前列腺組織及不同的前列腺病例外周血細胞和血漿進行實時熒光定量PCR檢測。定量分析的結(jié)果顯示PSAM及PSMA5具有較好的前列腺組織特異性及病變特異性，尤其是PSMA5具有更好的前列腺組織特異性，有望成為臨床診斷和治療前列腺癌的靶點，對PSMA5的研究拓展了

4、前列腺癌的研究思路，顯示出其良好的應用前景。 研究結(jié)論： 1.首先建立能定量區(qū)別PSMA野生型和PSMA5的PCR方法，為變異體的研究提供一個良好的技術平臺。 2.通過應用熒光定量PCR方法，從定性到定量水平證實PSMA5的組織特異性和病變特異性，是一個更好的前列腺癌研究的生物學標志和靶點。 3.首次應用熒光定量PCR方法檢測外周血PSMA野生型和PSMA5的表達，PSMA5各項指標都優(yōu)于一直沿用的PSA