丹參酮ⅡA在糖尿病血管并發(fā)癥中的作用及與MAPK的關系.pdf

1、目的：研究丹參酮ⅡA對高糖誘導的大鼠血管平滑肌細胞增殖的作用，及與 MAPK信號傳導通路的關系；并對糖尿病大鼠血管平滑肌細胞體外培養(yǎng)方法進 行探討，建立糖尿病大鼠血管平滑肌細胞模型。 方法：1)取正常大鼠主動脈，用組織貼壁法做血管平滑肌細胞的原代培養(yǎng)，以 及用STZ制作糖尿病大鼠模型并做糖尿病血管平滑肌細胞的原代培養(yǎng)，用二步 法進行SMA免疫組織化學染色來鑒定細胞；2)MTT法建立TSN的毒性試驗

2、標 準曲線；3)BrdU摻入DNA的ELISA法測定細胞DNA合成；4)熒光酶標儀的 方法檢測細胞內(nèi)游離鈣離子的含量，同位素示蹤法測定MAPK的活性。 結果：1)原代培養(yǎng)的大鼠血管平滑肌細胞通過SMA免疫組織化學染色后發(fā)現(xiàn)其 平滑肌細胞特有的肌纖維，確定所培養(yǎng)的細胞為血管平滑肌細胞；2)高糖可誘 導血管平滑肌細胞增殖和DNA合成，且呈劑量和時間依賴性；同時可刺激平滑 肌細胞內(nèi)游離鈣離子濃度

3、升高及MAPK活性增強；3)丹參酮ⅡA對高糖誘導的 血管平滑肌細胞的增殖和DNA合成呈現(xiàn)顯著的抑制作用，而且降低了細胞內(nèi)鈣 離子的濃度和MAPK水平；4)建立糖尿病大鼠模型一個月后做血管平滑肌細胞 原代培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)其呈現(xiàn)異常快速增殖狀態(tài)，且細胞內(nèi)MAPK活性較高，使用TSN 后，可明顯抑制此現(xiàn)象。 結論：1)丹參酮ⅡA對高糖誘導的血管平滑肌細胞增殖及DNA合成具有明顯抑 制作用的機理可能是其