參附注射液對缺氧復(fù)氧損傷心肌的保護(hù)作用及分子機(jī)制研究.pdf

1、研究背景和目的:隨著多種血管再通技術(shù)在臨床的廣泛應(yīng)用,心肌缺血再灌注損傷(Ischemia/reperfusion injury,IRI)已越來越受到廣大科研工作者的重視.探索心肌缺血再灌注損傷的機(jī)制和防治措施,已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一.參附注射液由紅參和黑附片提取物組成,主要含有人參皂甙和其它有效成分;是三九藥業(yè)集團(tuán)獨(dú)創(chuàng)產(chǎn)品,屬國家中藥保護(hù)品種.臨床廣泛用于心血管疾病,尤其是冠心病、心肌梗死等急癥,其用藥效果除迅速改善心絞痛、心肌

2、缺血癥狀外,還在于有效保護(hù)或改善缺血再灌注損傷心肌,且療效較好.但關(guān)于其作用機(jī)制還未見報道.該實(shí)驗(yàn)利用SD大鼠的乳鼠培養(yǎng)心肌細(xì)胞,并建立心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧(Hypoxia/Reoxygenation,H/R)損傷模型,通過細(xì)胞存活率、細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度、細(xì)胞內(nèi)熱休克蛋白(Heat ShockProteins,HSPs)70表達(dá)量和細(xì)胞內(nèi)核因子-κ B(Nuclear Factor-κ B,NF-κ B)活性變化等指

3、標(biāo)的檢測,觀察缺氧復(fù)氧對心肌細(xì)胞的影響,在此基礎(chǔ)上觀察參附注射液(ShenFu Injection,SFI)對缺氧復(fù)氧損傷心肌細(xì)胞的保護(hù)作用,并對其可能的作用機(jī)制進(jìn)行初步探討,從而為其臨床應(yīng)用及研究提供理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).方法:心肌細(xì)胞正常培養(yǎng)5日后分為六組:分別為正常對照組(Control),缺氧復(fù)氧損傷模型組(H/R),模型加低、中、高三個濃度的參附注射液組(H/R+SFI<,1>,H/R+SFI<,2>,H/R+SFI<,3>),模型

4、加維拉帕米注射液組(H/R+Ver).分組處理后,臺盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)各組細(xì)胞存活率,MTT比色法測量各組細(xì)胞活力,流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞內(nèi)HSP70表達(dá)量,雙波長熒光分光光度計(jì)測量各組細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,免疫組織化學(xué)方法檢測各組細(xì)胞內(nèi)NF-κ B活性變化.結(jié)論:參附注射液可提高缺氧復(fù)氧損傷心肌細(xì)胞的存活率,增加損傷心肌活力,減少損傷后凋亡心肌數(shù)量,減輕心肌細(xì)胞損傷程度;上述作用在一定濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系.參附注射液通過抑