褪黑激素對老年大鼠骨質(zhì)疏松性骨折愈合過程的影響.pdf

1、研究背景：骨質(zhì)疏松(Osteoporosis，OP)是以骨量減少、骨的微觀結(jié)構(gòu)退化為特征的，致使骨的脆性增加以及易于發(fā)生骨折的一種全身性骨骼疾病。隨著人們生活水平的提高，加快了社會老齡化進(jìn)程及人口壽命的增長。骨質(zhì)疏松癥及其所引起的骨折是中老年人的常見病、多發(fā)病，嚴(yán)重地危害中老年人的健康，已成為當(dāng)今世界廣泛關(guān)注的嚴(yán)重社會問題之一。 骨質(zhì)疏松尤其是雌激素缺乏導(dǎo)致的骨質(zhì)疏松癥發(fā)生有眾多機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)女性老年骨質(zhì)疏松患者發(fā)生分為急性和慢

2、性階段：急性階段主要是由于雌激素的缺乏導(dǎo)致的，而慢性階段主要是由于體內(nèi)鈣代謝發(fā)生變化引起的鈣丟失和繼發(fā)的甲狀腺功能亢進(jìn)導(dǎo)致的；男性老年骨質(zhì)疏松發(fā)生也是主要由于雌激素含量降低所致，但同時發(fā)現(xiàn)內(nèi)分泌激素系統(tǒng)分泌功能降低也起到重要作用，這些激素包括生長激素，胰島素生長因子-1，褪黑激素等。亦研究發(fā)現(xiàn)褪黑激素男性和女性老齡導(dǎo)致的骨質(zhì)疏松癥都密切相關(guān)，更年期患者會導(dǎo)致褪黑激素分泌降低，并且血中褪黑激素含量的降低可能是絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松發(fā)生的重要影響因

3、素。 褪黑激素是松果體分泌的一種吲哚類的化學(xué)物質(zhì)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)是5-甲氧基-N-乙酰色胺，是色氨酸衍生物，廣泛被應(yīng)用于神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)，生物節(jié)律，延緩衰老及抗自由基損傷，鎮(zhèn)靜，鎮(zhèn)痛催眠，抗驚厥，而且對心血管，腎臟等器官有廣泛作用。最近研究發(fā)現(xiàn)其通過直接或間接途徑來影響骨代謝平衡。 褪黑激素是現(xiàn)在市場上熱銷的腦白金主要成份，其已被廣泛應(yīng)用于調(diào)節(jié)生物節(jié)律、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、抗衰老及抗腫瘤中。但關(guān)于其對骨質(zhì)疏

4、松及骨折愈合方面的研究，國內(nèi)外報道尚少。 目的：探討褪黑激素對老年大鼠骨質(zhì)疏松性骨折愈合過程的影響。 方法：選用22月齡老年雄性SD大鼠70只，經(jīng)隨機(jī)抽取10只測出全身骨密度，與隨機(jī)抽取的10只12月齡雄性SD大鼠的骨密度對比并做統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)值降低(P＜0.05)，確立老年大鼠骨質(zhì)疏松模型。將老年大鼠制成左股骨骨折模型，直徑1.5mm克氏針?biāo)鑳?nèi)固定。隨機(jī)分為對照組和褪黑激素組，褪黑激素組于術(shù)后給予褪黑激素腹腔注射[15

5、](50μg/100/d)，對照組給予同體積0.9％氯化鈉注射液腹腔注射，共10天。兩組均在術(shù)后2w、4w、8w、12w各隨機(jī)處死5只，取骨痂，4％多聚甲醛固定24小時，20％EDTA(PH=8.0)脫鈣5周，切片，行HE染色、OPG免疫組織化學(xué)染色觀察及免疫組化圖像分析；并于2w、4w、8w和12w測骨痂骨密度及4w、8w和12w測右側(cè)股骨骨密度；2w、4w、8w和12w測定血清鈣、磷及堿性磷酸酶(ALP)；12w行放射學(xué)(X線片)觀

6、察。所得到的計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，實驗組與對照組均數(shù)間比較采用兩樣本資料的t檢驗，P＜0.05為差別有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1．組織學(xué)觀察：HE染色：褪黑激素組軟骨生成及軟骨內(nèi)成骨過程較對照組提前；OPG免疫組織化學(xué)染色：兩組OPG表達(dá)的定位無差別，經(jīng)圖像分析，褪黑激素組在各個時間段OPG蛋白陽性表達(dá)的積分光密度(IOD)值均強(qiáng)于對照組，差別有統(tǒng)計學(xué)意義； 2．骨密度：褪黑激素組各時間段骨痂骨密度均較對照組

7、增加，差別有統(tǒng)計學(xué)意義；兩組各時間段右側(cè)股骨骨密度的差別有統(tǒng)計學(xué)意義； 3．鈣磷乘積、堿性磷酸酶(ALP)：褪黑激素組ALP較對照組增加，差別有統(tǒng)計學(xué)意義，鈣磷乘積兩組的差別有統(tǒng)計學(xué)意義； 4．放射學(xué)觀察：褪黑激素組術(shù)后12w骨折線變模糊，骨痂連接斷端，髓腔再通；對照組術(shù)后12w骨折線仍較清晰，斷端骨痂連接不緊密。 結(jié)論： 1．褪黑激素通過提高OPG的表達(dá)，抑制破骨細(xì)胞的增值、分化，從而促進(jìn)老年大鼠骨質(zhì)疏