銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液的研制.pdf

1、銀杏內(nèi)酯是從銀杏葉中提取的重要化學(xué)物質(zhì)之一，是血小板活化因子PAF的受體拮抗劑，能明顯抑制血液中血小板的聚集，從而有效降低血液粘稠度，改善相應(yīng)組織器官的供血。根據(jù)銀杏內(nèi)酯的特點(diǎn)以及心腦血管疾病的發(fā)病機(jī)理，研制了銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液。本課題主要研究了從銀杏葉中提取精制注射用銀杏內(nèi)酯的方法，銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液處方篩選及工藝研究，注射用銀杏內(nèi)酯以及注射液質(zhì)量研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立以及主要藥效學(xué)等。 通過(guò)單因素試驗(yàn)，比較不同濃度的溶劑、

2、不同提取次數(shù)對(duì)銀杏葉原料的提取效果，研究大孔樹(shù)脂用量對(duì)吸附樣品量的影響，研究不同濃度的洗脫溶液對(duì)樣品洗脫過(guò)程的影響；通過(guò)對(duì)以不同溶劑進(jìn)行重結(jié)晶試驗(yàn)的比較，選擇適宜的重結(jié)晶溶劑；在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并進(jìn)行因素分析和優(yōu)化，從而確定注射用銀杏內(nèi)酯的精制方法。其精制方法為取干銀杏葉，用清水淋洗后，用60％乙醇煎煮，濾除藥渣，濃縮回收乙醇至流浸膏，加水沉淀，離心，上清液通過(guò)大孔樹(shù)脂柱吸附，吸附完成后，先后用去離子水和乙醇洗脫，將洗

3、脫液回收，殘留物用乙酸乙酯萃取，棄去不溶解物，回收乙酸乙酯至適量，放冷，析出沉淀，過(guò)濾得粗品，用90％乙醇重結(jié)晶，得精品。對(duì)所得銀杏總內(nèi)酯進(jìn)行HPLC分析以及其他分析方法研究，建立了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確定了色譜條件和技術(shù)參數(shù)以及指紋圖譜，對(duì)供試品進(jìn)行指紋圖譜的分析，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間，確定共有峰在指紋圖譜上共有4個(gè)。 銀杏內(nèi)酯難溶于水，因此，制備注射液首先要解決其溶解度和溶液穩(wěn)定性問(wèn)題，通過(guò)研究銀杏內(nèi)酯在不同溶媒中的溶解情況以及應(yīng)用不同助

4、溶劑后的溶液穩(wěn)定性情況，選擇既能使銀杏內(nèi)酯完全溶解，又能使其穩(wěn)定的溶媒和助溶劑，經(jīng)過(guò)試驗(yàn)，用注射用水∶乙醇∶聚乙二醇(1∶0.01∶0.05)制得的溶液澄明度好，故選用作為溶媒；用羥丙基-β-環(huán)糊精制得的銀杏內(nèi)酯溶液的物理穩(wěn)定性較佳，故選用作為溶解銀杏內(nèi)酯時(shí)的助溶劑，這與羥丙基-β-環(huán)糊精能形成包合物有關(guān)；試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)pH值對(duì)銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液穩(wěn)定性影響較大。pH3.5到pH7.0隨著pH的增高，穩(wěn)定性越差。在pH3.5～5.5之間，色

5、澤、澄明度和含量幾乎沒(méi)有變化，故本品適宜的pH值范圍為3.5～5.5。確定了銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液的處方工藝，制得的制劑質(zhì)量穩(wěn)定，各項(xiàng)指標(biāo)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。通過(guò)對(duì)10批銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液指紋圖譜的分析，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間，確定共有峰在指紋圖譜上共有3個(gè)，由于所采用的溶劑峰信號(hào)強(qiáng)，共有峰確定時(shí)排除了溶劑峰。試驗(yàn)觀察了銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液靜脈注射給藥對(duì)大鼠腦缺血的保護(hù)作用、對(duì)小鼠凝血時(shí)間、血小板數(shù)、兔血小板聚集功能、大鼠頸動(dòng)脈血栓形成和血液流變學(xué)

6、的影響以及靜脈滴注對(duì)麻醉犬腦血流量、腦血管阻力、血壓、心率、心電圖的影響。結(jié)果表明銀杏內(nèi)酯氯化鈉注射液可明顯減輕急性不完全性腦缺血引起的腦水腫；對(duì)小鼠凝血時(shí)間有明顯的延長(zhǎng)作用，而對(duì)血小板數(shù)無(wú)明顯影響；對(duì)血小板激活因子PAF誘導(dǎo)的兔血小板聚集具有明顯的抑制作用；可明顯延長(zhǎng)大鼠電刺激所致頸動(dòng)脈血栓形成的時(shí)間；可以明顯降低腎上腺素血瘀模型大鼠的血液粘度；可明顯增加麻醉犬腦血流量和降低腦血管阻力，而對(duì)血壓、心率、心電圖各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯影響。