新型水溶性光敏劑的評價和機制研究.pdf

1、一、新型水溶性卟啉類光敏劑A1抗腫瘤作用及其機制研究
　　 具有優(yōu)良的物理化學性質(zhì)的光敏劑的研究是目前PDT治療中的關鍵問題。本實驗室合成的光敏劑A1具有很多優(yōu)點：如合成方法簡單，結(jié)構(gòu)單一，較好的水溶性，較好的光穩(wěn)定性、在650nm處可以激發(fā)等。前期研究表明A1體外具有很好的PDT療效，本文在此基礎上進一步研究了A1的抗腫瘤作用及其作用機制。體外MTT實驗結(jié)果表明單純給藥或光照對腫瘤細胞的生長無或很小影響，而光照下A1-PDT能

2、明顯抑制多種人類腫瘤細胞，說明A1-PDT在體外具有抗腫瘤作用。A1的亞細胞定位與細胞緊密相關。激光共聚焦顯微鏡顯示化合物A1主要定位在腫瘤細胞的溶酶體中，但是在A549和DU145細胞在細胞的線粒體中也有一定聚集，說明光敏劑A1發(fā)揮光化學反應以及其損傷的首要細胞器為溶酶體。與此對應，A1-PDT引發(fā)的細胞死亡因細胞而異：流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn)A1-PDT可以誘導人黑色素瘤細胞A375產(chǎn)生凋亡，并且有較好的劑量依賴性，而對人前列腺癌DU-1

3、45只引起了少量凋亡，同時A1-PDT可以誘導人前列腺癌DU-145細胞產(chǎn)生大量的自噬泡。上述結(jié)果表明A1-PDT可以通過自噬途徑或凋亡途徑誘導腫瘤細胞死亡，因細胞而異。體內(nèi)荷瘤鼠實驗模型證明A1在給藥后18-24小時腫瘤的內(nèi)的藥物含量達到高峰。A1-PDT可以抑制小鼠肝癌H-22，人肺癌A549，人黑色素瘤A375和人肝癌Hepg2生長，且局部瘤內(nèi)給藥模式抑制作用最強，說明A1-PDT在體內(nèi)仍具有很好的抗腫瘤活性。
　　 二、

4、新型水溶性卟啉類光敏劑A1-光動力學對大鼠前列腺增生影響及機制初步研究
　　 良性前列腺增生也稱前列腺肥大，是中老年男性的常見病。微創(chuàng)的介入治療已成為臨床治療BPH的首選。光動力療法的優(yōu)點是毒性小、收效快、靶向性強，在殺傷增殖細胞的同時不危及正常組織。同時，PDT操作簡便、損傷副作用小、可反復進行，對一些年老體弱、全身狀況差的患者也可治療，由于具有上述優(yōu)點，PDT的應用范圍正被推廣到更多的良性疾病中去。我們探索了A1-PDT在治

5、療前列腺肥大方面的應用。結(jié)果表明A1-PDT顯著抑制大鼠BPH中前列腺的增生，同時不會損傷到比鄰的組織（結(jié)直腸和膀胱組織）。機制研究顯示：A1-PDT可以抑制VEGF和bFGF兩種重要的多肽生長因子在BPH中的表達，同時上調(diào)凋亡基因BAX的表達促進BPH中細胞發(fā)生凋亡進而抑制前列腺的組織的增殖。
　　 三、水溶性糖酞菁光敏劑篩選、構(gòu)效關系研究及其機制研究
　　 酞菁類作為光敏劑具有其特有的優(yōu)勢但是酞菁水溶性差的缺點嚴重的

6、限制了其使用。本研究中我們利用半乳糖作為修飾集團，來改善酞菁的水溶性和其生物相容性，并對其構(gòu)效關系進行了研究。結(jié)果表明，以半乳糖修飾的酞菁具有較好的水溶性，且伴隨取代糖數(shù)目的增加酞菁化合物的水溶性增加，化合物單線態(tài)氧的產(chǎn)率下降?；衔锞哂休^緩慢的光漂白率，其中T4的光漂白率最低。對于1-3個半乳糖修飾的酞菁化合物T1，T2，T3在治療范圍內(nèi)對腫瘤細胞無明顯細胞毒性而在光照下它們能顯著抑制多種腫瘤細胞的增殖。細胞定位實驗表明該類化合物的

7、細胞定位與化合物結(jié)構(gòu)及細胞種類密切相關：T1，T2主要聚集在HepG2細胞的線粒體內(nèi)，溶酶體僅有少量進入；而T3主要聚集在HepG2細胞的溶酶體內(nèi)，線粒體僅有少量進入；T1，T2，T3在人黑色素瘤A375中的亞細胞定位與HepG2細胞相似；T1，T2，T3在人肺癌A549中T2和T3在線粒體和溶酶體均有較強的進入。化合物T1，T2-PDT可以降低線粒體的膜電位，并可以誘導腫瘤細胞產(chǎn)生凋亡。T3-PDT可以誘導人肺癌A549細胞產(chǎn)生大量的