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1、目的:通過(guò)細(xì)胞水平和活體動(dòng)物,來(lái)探討新型葉綠素類光敏劑——2-1-己氧乙基-2-去乙烯基卟吩e6三鈉鹽(HCE6)的光動(dòng)力療法對(duì)于QBC939系膽管癌細(xì)胞和荷瘤裸鼠模型的光動(dòng)力治療效果,并進(jìn)一步研究探討其量效關(guān)系。
方法:用細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(CCK8)檢測(cè)652nm不同激光光強(qiáng)度(0.6J/cm2,1.8J/cm2,2.7J/cm2,5.4J/cm2)及不同濃度光敏劑HCE6(0μg/ml、0.3μg/ml、0.5μg
2、/ml、1.0μg/ml、15μg/ml、2.0μg/ml)光動(dòng)力處理下QBC939系人膽管癌細(xì)胞的增殖率,找出此光敏劑光動(dòng)力療法抑制瘤細(xì)胞最適光療劑量和光敏劑濃度。并比較最適光療劑量下光毒性與暗毒性差異。建立QBC939系人膽管癌細(xì)胞荷瘤裸鼠模型,將其分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,兩組都進(jìn)行尾靜脈注射光敏劑0.5mg/kg,24h后光動(dòng)力組接受激光治療(激光劑量:120J/cm2,功率0.2w,治療20min),而對(duì)照組不給予激光治療,兩組裸鼠
3、均需避光飼養(yǎng)。在激光治療后1d、3d、5d、7d、9d、11d、13d、15d觀察、記錄并計(jì)算實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組裸鼠瘤體體積,并比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組瘤塊體積大小以及變化差異,繪制腫瘤體積-時(shí)間變化曲線。并與第15d斷頸法處死裸鼠,取其腫瘤置于10%甲醛中固定,浸蠟包埋,制作切片,并HE染色,光鏡下觀察,并對(duì)比觀察瘤體病理變化。
結(jié)果:HCE6-PDT處理瘤細(xì)胞的最適光療強(qiáng)度2.7J/cm2劑量,最適光敏劑濃度為1.5μg/ml;在這
4、個(gè)光照輕度和光敏劑濃度下,增加光照強(qiáng)度和光敏劑濃度,膽管癌細(xì)胞增殖率呈逐漸下降趨勢(shì),超過(guò)這個(gè)光照強(qiáng)度和光敏劑濃度,其與最適劑量下細(xì)胞增殖率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。荷瘤裸鼠模型實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)處理后的每天,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組都有明顯腫瘤體積差異(p<0.05)。光動(dòng)力治療第15d,實(shí)驗(yàn)組瘤塊體積0.5-/+0.010cm3,而對(duì)照組2.25-/+0.015cm3,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組體積差異明顯(p<0.05)。
結(jié)論:無(wú)論細(xì)胞水平還是
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