藻膽蛋白作為光敏劑應(yīng)用于腫瘤光動力治療的研究.pdf

1、中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)博士學(xué)位論文藻膽蛋白作為光敏劑應(yīng)用于腫瘤光動力治療的研究姓名：李冠武申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：李振剛19990701串莓辯學(xué)技術(shù)穴學(xué)博士論文的構(gòu)象，搜其鴦超螟凌是開巧棟蒙轉(zhuǎn)攏。漣著藻紅蛋巍懿濃發(fā)鶼增熱，好gDNA的艟逐漸增加，而超螺旋的量逐漸減少?？赡苁怯捎赑DT產(chǎn)生的單線態(tài)氧等活性氧組份慰DNA分子豹囊接剪甥作用，使手罨超螺旋菸麓成為帶切口的環(huán)行DNA分子。飽和氧氣能夠增強(qiáng)藻紅疆白的PDT對

2、瘸細(xì)胞的殺傷性。10％血清對PDT的效率沒有影響。卜一第四部分主要是從形態(tài)學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和光化學(xué)的角度，對藻紅蛋白介導(dǎo)光動力治療的機(jī)制進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。f形態(tài)學(xué)觀察藻紅蛋白與腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)外的結(jié)合，表明其介導(dǎo)的光動力效應(yīng)與藻紅蛋白結(jié)合細(xì)胞的狀態(tài)有關(guān)。隨著藻紅蛋白濃度的增加，細(xì)胞結(jié)合與瘤細(xì)胞的能力增強(qiáng)，光動力殺傷增強(qiáng)。體外藻紅蛋白能夠進(jìn)入細(xì)胞，結(jié)合于細(xì)胞漿、細(xì)胞核；在體內(nèi)則主要以結(jié)合細(xì)胞膜和細(xì)胞漿為主，未觀察到與細(xì)胞核的結(jié)合。這可能與

3、體內(nèi)外的細(xì)胞生長環(huán)境有關(guān)。從結(jié)合曲線看，當(dāng)濃度達(dá)到100pg／ml時(shí)，結(jié)合曲線較為平緩說明藻紅蛋白結(jié)合到瘤細(xì)胞表現(xiàn)出一定的飽和性。對藻紅蛋白介導(dǎo)光動力效應(yīng)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究結(jié)果顯示：RPEPDT能誘導(dǎo)S180、HL60和7721細(xì)胞出現(xiàn)凋亡。DNALadders和流式細(xì)胞儀分析的結(jié)果均表明，隨著PDT處理后培養(yǎng)的時(shí)間延長，凋亡細(xì)胞數(shù)逐漸增加。7721是貼壁生長細(xì)胞，它在RPEPDT誘導(dǎo)的凋亡過程，表現(xiàn)為變圓、漂浮和成團(tuán)等幾個(gè)過程，同時(shí)也

4、檢測到凋亡DNALadders的出現(xiàn)。本部分晟后，以藻紅蛋白光漂白為主要研究對象，對RPEPDT的光化學(xué)機(jī)制進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：藻紅蛋白介導(dǎo)光敏反應(yīng)遵循Foote反應(yīng)機(jī)制，能夠產(chǎn)生單線態(tài)氧和氧自由基等活性氧組份，二者在一定條件下可互相轉(zhuǎn)化。I型反應(yīng)抑制劑二甲亞砜能夠使反應(yīng)向產(chǎn)生單線態(tài)氧的II型轉(zhuǎn)換。同時(shí)不同濃度的藻紅蛋白的光漂白結(jié)果顯示：當(dāng)藻紅蛋白的濃度達(dá)到一定的值(4001as／m1)時(shí)，濃度再增加時(shí)，光漂白效應(yīng)并不繼續(xù)上升，達(dá)到8