聯(lián)合應(yīng)用骨髓基質(zhì)細(xì)胞與bcl-2基因治療大鼠局灶性腦缺血后bFGF的表達(dá)研究.pdf

1、目的: 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSCs)與bcl-2基因聯(lián)合應(yīng)用來(lái)治療大鼠局灶性腦缺血，觀察BMSCs凋亡情況，bcl-2蛋白表達(dá)水平，神經(jīng)功能恢復(fù)情況，同時(shí)檢測(cè)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)表達(dá)是否增加，來(lái)研究?jī)煞N因素聯(lián)合應(yīng)用是否有協(xié)同作用。 方法: 40只大鼠制作成大腦中動(dòng)脈缺血(MCAo)模型，隨機(jī)分為：空白對(duì)照組，單純bcl-2組，單純BMSCs組和實(shí)驗(yàn)組(BMSCs+bcl-2)，每組10只。分

2、別于造模后3小時(shí)和24小時(shí)經(jīng)頸動(dòng)脈和尾靜脈注入pLXSN-bcl-2質(zhì)粒和Brdu標(biāo)記的BMSCs，大鼠神經(jīng)功能評(píng)分；每組再按照缺血再灌注后3天，14天分為2個(gè)亞組，每組5只，免疫組化法觀察bFGF表達(dá)水平，bcl-2蛋白表達(dá)水平，BrdU標(biāo)記的BMSCs在腦內(nèi)的分布及數(shù)量，TUNEL法檢測(cè)腦內(nèi)細(xì)胞凋亡情況。全部資料采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各組數(shù)據(jù)均以Means±SD表示，P<0.05表示差異有顯著性。 結(jié)果

3、: 1．實(shí)驗(yàn)組3天神經(jīng)功能評(píng)分明顯小于空白對(duì)照組(P<0.05)，14天神經(jīng)功能評(píng)分明顯小于其余3組(P<0.05)； 2．實(shí)驗(yàn)組腦內(nèi)細(xì)胞凋亡在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)較其余3組明顯減小(P<0.05)，單純BMSCs及單純bcl-2腦內(nèi)細(xì)胞凋亡在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)較空白對(duì)照組明顯減小(P<0.05)。 3．實(shí)驗(yàn)組和單純BMSCs組在梗死半球側(cè)可見(jiàn)大量BrdU陽(yáng)性的BMSCs細(xì)胞，主要存在于梗死灶周邊，對(duì)側(cè)半球也可見(jiàn)少量BrdU陽(yáng)性細(xì)

4、胞。實(shí)驗(yàn)組3天、14天BrdU陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯多于單純BMSCs組。 4．實(shí)驗(yàn)組bFGF表達(dá)水平在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)較單純BMSCs、單純bcl-2組及空白對(duì)照組明顯增加(P<0.05)單純BMSCs及單純bcl-2組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)較空白對(duì)照組明顯增加(P<0.05)5．實(shí)驗(yàn)組3天、14天梗死灶側(cè)bcl-2蛋白表達(dá)水平明顯高于其余3組(P<0.05)。 結(jié)論：在局灶性腦梗死實(shí)驗(yàn)中，骨髓基質(zhì)細(xì)胞與Bcl-2基因均有治療作用，兩者聯(lián)合應(yīng)