骨髓基質(zhì)干細(xì)胞動(dòng)脈移植治療大鼠短暫性局灶性腦缺血.pdf

1、目的：近年來，隨著社會(huì)人口老齡化，腦血管病的發(fā)病率不斷升高。腦血管病已經(jīng)成為人類死亡的三大主要原因之一，對(duì)缺血性腦損傷的治療方法和治療藥物的研究是當(dāng)前神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。本研究采用骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow stromal cells，MSCs)移植來對(duì)大鼠大腦中動(dòng)脈局灶性腦缺血模型進(jìn)行干預(yù)，探討骨髓基質(zhì)干細(xì)胞在急性局灶性腦缺血疾病治療中的作用及其機(jī)制。 方法：線拴法制作SD大鼠大腦中動(dòng)脈缺血模型(MCAO)

2、(n=80)，隨機(jī)均分為假手術(shù)組(A組)，缺血模型組(B組)，缺血+磷酸鹽緩沖液(PBS)對(duì)照組(C組)和缺血+MSCs組(D組)。缺血2 h后再灌注，D組將2×10<'6>個(gè)MSCs通過頸動(dòng)脈移植入腦缺血大鼠體內(nèi)，C組經(jīng)頸動(dòng)脈注入等體積的PBS液，B組不做任何處理。A組麻醉后，做頸部正中切口，暴露頸總動(dòng)脈，頸內(nèi)動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈、翼腭動(dòng)脈后縫合皮膚。再灌注24小時(shí)后，分別觀察神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分，腦梗死體積，尼氏小體平均狄度，凋亡相關(guān)基因Bcl

3、-2，Bax及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表達(dá)。 結(jié)果： 1、神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分：A組為0分，B組為(3.7±0.5)明顯高于D組(2.0±0.6)，具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。C組(3.6±0.6)，與D組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。而B組與C組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2、腦梗死體積：A組梗死體積為0，B組梗死體積為(208±

4、26)mm<'3>、C組為(210±18)mm<'3>，D組為(130±17)mm<'3>。D組梗死體積明顯小于B、C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，B組和C組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異3、病理形態(tài)學(xué)： 1) 尼氏，小體：A組平均狄度值(109.73±10.96)，B組為(178.18±21.66)，C組為，163.64±20.29)，D組為(124.36±14.85)。尼氏體的乎均次度值與細(xì)胞內(nèi)尼氏體含量旱反比：平均灰度值越低，其細(xì)胞

5、內(nèi)尼氏體含量越高。A組尼氏體的平均灰度值最低，尼氏體含量最高。B組尼氏體的平均灰度值最高，尼氏體含量最低。D組的平均狄度值與B組、C組相比明顯下降，說明其細(xì)胞內(nèi)尼氏體含量有明顯提高，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異(P<0.01)。而C組與B組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2) Bcl-2免疫組化染色：Bcl-2的表達(dá)A組為(0.15±0.03)，B組為(0.39±0.04)，C組為(0.41±0.03)，D組為(0.68±0.11)。Bcl-2的過度表

6、達(dá)具有神經(jīng)元保護(hù)作用。以D組為最高，與其他各組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，但B、C兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3) Bax免疫組化染色：Bax表達(dá)A組為(0.19±0.03)，B組為(0.54±0.05)，C組為(0.45±0.03)，D組為(0.27±0.03)。細(xì)胞受損時(shí)Bax表達(dá)增強(qiáng)。以B組表達(dá)最強(qiáng)，C組次之，A組最低，D組與B、C二組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，但B、C兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4) VE

7、GF的表達(dá)：A組為(3.256±1.920，﹪)，B組為(3.345±1.400，﹪).C組為(3.940±0.945，﹪)，D組為(7.207±2.245，﹪)。MSCs移植后，在腦內(nèi)存活、遷徙、分泌血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)，與其他組相比.D組VEGF含量明顯增高，與各組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05) 。 結(jié)論： 1、動(dòng)脈移植MSCs治療缺血性腦損傷具有較好的療效，能夠明顯改善神經(jīng)功能缺損。 2、動(dòng)