化療后骨髓再生細胞移植治療局灶性腦缺血.pdf

1、背景: 近年來關于干細胞研究取得諸多突破性進展，其中骨髓干細胞(bone marrow stem cells, BMSCs)由于其來源方便、含量豐富、在體內外多向分化潛能的發(fā)現及在臨床疾病治療中的廣泛應用，深受人們關注。研究結果表明，骨髓干細胞對缺血性腦損傷具有極大的治療潛能。盡管現在對其移植入腦內后是否具有功能和轉分化潛能存在很大爭議，但是其能夠分泌大量營養(yǎng)因子，提高受損大腦的可塑性，同時激活內源性修復機制從而發(fā)揮其對缺血性腦損傷的治

2、療價值，而這些功能的發(fā)揮并不需要其在移植后轉分化為神經元與宿主結構相整合。 目的: 建立改良的大鼠大腦中動脈線栓模型；并將骨髓細胞和5-氟尿嘧啶(5-FU)化療后的骨髓再生細胞(bone marrow regenerative cells, BMRCs)經尾靜脈移植入模型大鼠體內，然后觀察這兩種細胞在模型大鼠腦中存活的情況，以及對病灶腦組織結構和神經功能恢復的影響，并進一步探討這兩種細胞在治療腦缺血中的價值及機制。 材料

3、和方法: 采用經過本人摸索改良的方法建立大鼠大腦中動脈線栓(MCAO)模型，隨機分為對照組(control group)、骨髓細胞移植組(BMCs group)、5-FU化療后骨髓再生細胞移植組(BMRCs group)。模型成功后分別于術后24h經尾靜脈注射磷酸鹽緩沖(PBS)、新鮮骨髓細胞懸液(DAPI標記)和5-FU化療后骨髓再生細胞懸液(DAPI標記)各1ml。各組大鼠分別于術后應用熒光激發(fā)檢測移植的細胞在腦內存活情況，采用尼氏

4、染色和免疫組化檢測缺血區(qū)病理改變及新生血管情況，采用TTC染色檢測腦梗死體積，應用采用改良神經功能損害評分(modified Neurological Severity Scores, mNSS)評價治療前后的神經功能情況。 結果: 兩類細胞移植組在熒光激發(fā)下均可見DAPI 標記的細胞在梗塞區(qū)及其周邊區(qū)聚集并存活；移植后2W組織學觀察，與對照組相比兩移植組梗塞區(qū)腦組織結構恢復較好；免疫組組化和行為學檢測顯示這兩種細胞都能夠減少半

5、暗帶區(qū)細胞凋亡、促進半暗帶區(qū)VEGF mRNA的表達、促進血管再生、減少半暗帶區(qū)細胞凋亡、減少腦梗死體積并促進行為學功能的恢復（與對照組相比P<0.05），并以5-FU化療后骨髓再生細胞的治療效果較顯著（與骨髓細胞組相比P<0.05）。 結論: 骨髓細胞和5-FU化療后骨髓再生細胞經靜脈移植后在宿主腦內均能夠存活，均能減少半暗帶區(qū)細胞凋亡、促進半暗帶區(qū)VEGF mRNA的表達、促進血管再生、減少半暗帶區(qū)細胞凋亡、減少腦梗死體積并