老鼠皮膚前體細胞中側(cè)群細胞的分選及特性分析.pdf

1、目的：檢測和分選SKPs中的側(cè)群細胞（SP），并對其體外增殖和分化能力進行初步分析。
　　 方法：選擇經(jīng)過培養(yǎng)的SKPs細胞群，以Hoechst33342和PI 熒光染料染色，維拉帕米拮抗對照，應用流式細胞儀熒光激活分選法檢測SP細胞。SP細胞和MP細胞同時分類收集，分別添加培養(yǎng)基和生長因子培養(yǎng)。收集經(jīng)2 次傳代培養(yǎng)后的SP細胞重懸，接種于24 孔培養(yǎng)皿，誘導其向神經(jīng)元和許旺細胞分化。利用免疫熒光細胞技術(shù)和RT-PCR技術(shù)檢測S

2、P細胞和分化后細胞的特殊標記物。
　　 結(jié)果：通過FACS 法從SKPs細胞懸液中分離出SP細胞，稱為皮膚前體細胞的側(cè)群細（SKP-SP)，其比例為0.1％.相對MP細胞，SP細胞具有更強的細胞增殖能力，能長期傳代培養(yǎng)。免疫熒光和RT-PCR檢測結(jié)果顯示，SP細胞表達SKPs的特殊標記物Nestin和Fibronectin。分化后的細胞分別表達神經(jīng)元的特殊標記物NeuN，NF-M，和許旺細胞的特殊標記物GFAP，S100。