(-)-棉酚對滑膜肉瘤細胞增殖與凋亡的影響及其機制的研究.pdf

1、目的：探討（－）-棉酚對人滑膜肉瘤SW-982細胞體外增殖和凋亡的影響及其可能的作用機制。方法:M TT法檢測（－）-棉酚對SW-982細胞的增殖抑制作用；Wright-Giemsa染色、Hoechst33258熒光染色及透射電鏡觀察（－）-棉酚作用后SW-982細胞形態(tài)的變化；流式細胞儀觀察（－）-棉酚對細胞周期的調(diào)控作用和細胞凋亡率的影響；Western blot方法分析（－）-棉酚對細胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2，Bax表達水平的影響

2、；比色法研究（－）-棉酚對Caspase-9和Caspase-3活性的影響。結(jié)果：（－）-棉酚對人滑膜肉瘤株SW-982具有生長增殖抑制作用，并且這種作用呈時間、劑量依賴效應。隨著（－）-棉酚濃度的增加和作用時間的延長，其對細胞增殖的抑制作用明顯增強。Wright-Giemsa染色光學顯微鏡下、Hoechst33258染色熒光顯微鏡下及透射電鏡鏡下均可見經(jīng)4.0μmol/L的（－）-棉酚作用24h后SW-982細胞出現(xiàn)凋亡的特征性形態(tài)學

3、改變。經(jīng)（－）-棉酚作用24h后，隨著濃度的增加，SW-982細胞中G0/G1期細胞數(shù)比例增加，而G2/M期、S期細胞數(shù)比例均有不同程度減少，細胞被阻滯于G0/G1期，表明（－）-棉酚對SW-982細胞具有細胞周期調(diào)控作用，Annexin V/PI雙染法流式細胞儀測得細胞早期凋亡率也同（－）-棉酚濃度呈正相關(guān)關(guān)系。經(jīng)（－）-棉酚作用24h后， SW-982細胞中的凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達與（－）-棉酚濃度呈負相關(guān)關(guān)系，而Bax蛋白的

4、表達與（－）-棉酚濃度呈正相關(guān)關(guān)系。4.0μmol/L的（－）-棉酚作用不同時間后出現(xiàn)了Caspase-9、Caspase-3活性的變化。作用12h時，Caspase-9活性達到高峰，隨后活性呈下降趨勢，作用18h時Caspase-3活性達到高峰，隨后活性呈下降趨勢。結(jié)論：本研究證實（－）-棉酚對人滑膜肉瘤株SW-982具有抑制增殖和誘導凋亡的作用，其作用機制可能與Bcl-2蛋白表達水平下調(diào)，Bax蛋白表達水平上調(diào)，Caspase-9、