針刺調(diào)節(jié)Notch信號(hào)介導(dǎo)氣道高反應(yīng)Foxp3-RoRγt失衡的機(jī)制研究.pdf

1、氣道高反應(yīng)性(Bronchial Hyperresponsiveness，BHR)是指氣道對(duì)正常不引起或僅引起輕度應(yīng)答反應(yīng)的特異性抗原刺激和非特異性刺激，出現(xiàn)過度反應(yīng)，發(fā)生氣道過度狹窄或支氣管收縮。以氣道高反應(yīng)為主要特征的支氣管哮喘是當(dāng)前全球范圍內(nèi)危害人類健康的常見慢性病，發(fā)病率占普通人群的1％-18％（哮喘國際指南GINA2014）[1]，據(jù)統(tǒng)計(jì)，世界范圍內(nèi)有超過三億的哮喘患者，雖然近年來防治哮喘的工作不斷深入，但是其發(fā)病率及死亡率仍

2、呈上升趨勢(shì)[2]。且BHR不僅僅發(fā)生于哮喘患者，而且常常發(fā)生在一些呼吸系統(tǒng)疾患的患者，諸如伴隨肺氣腫、過敏性鼻炎、慢性支氣管炎以及上、下呼吸道感染等疾患的患者[3，4]。此類患者在圍術(shù)期極易發(fā)生支氣管痙攣、肺水腫等危急情況，已成為嚴(yán)重影響人們身心健康的公共衛(wèi)生問題。有研究發(fā)現(xiàn)氣道反應(yīng)性疾病患者術(shù)中和術(shù)后支氣管痙攣的發(fā)生與氣管插管相關(guān)，術(shù)中支氣管痙攣的發(fā)生率插管全麻(8.9％)要遠(yuǎn)高于不插管全麻(0％)[5,6]。而隨著社會(huì)的發(fā)展，全麻患

3、者的比例越來越高，因此預(yù)防圍術(shù)期氣道高反應(yīng)的的發(fā)生尤為重要，但目前對(duì)氣道高反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制尚不十分清楚。
　　中醫(yī)藥作為治療氣道高反應(yīng)的常用措施，其療效已獲得中西醫(yī)呼吸學(xué)專家的認(rèn)可（2013版中國支氣管哮喘防治指南將中醫(yī)藥列入支氣管哮喘的臨床治療中）[7]。針刺作為中醫(yī)藥治療氣道高反應(yīng)的重要手段，歷代醫(yī)家及近現(xiàn)代臨床研究已證實(shí)其可以調(diào)節(jié)免疫功能[8,9]，對(duì)氣道高反應(yīng)有良好的治療作用，但是針刺治療氣道高反應(yīng)的具體作用機(jī)制及作用靶點(diǎn)是

4、什么？這仍然是制約傳統(tǒng)針刺療法發(fā)展的“瓶頸”之一。因此，本課題擬建立卵清蛋白(OV-albumin，OVA)致敏氣道高反應(yīng)BALB/c(BALB/cAnNCrl)小鼠模型，觀察傳統(tǒng)針刺療法對(duì)OVA致敏氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠的作用，并以此為基礎(chǔ)探討針刺通過Notch信號(hào)介導(dǎo)調(diào)節(jié)氣道高反應(yīng)小鼠Foxp3/RoR失衡的機(jī)制，以期為針刺在圍術(shù)期氣道高反應(yīng)中的應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　第一節(jié)針刺對(duì)OVA致敏BALB/c小鼠氣道高反應(yīng)

5、的影響
　　目的:
　　觀察傳統(tǒng)針刺療法對(duì)OVA致敏氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠的作用。
　　方法:
　　一、氣道高反應(yīng)模型的建立及分組:
　　SPF級(jí)BALB/c小鼠30只，6～8周，體重18～20g，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NC組)10只，氣道高反應(yīng)模型組（BHR組）10只，針刺模型組(ACA組)10只。
　?。ㄒ唬獾栏叻磻?yīng)模型組（BHR組）:參照文獻(xiàn)的方法BALB/c小鼠在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)三天，分別于第

6、4、11、18天腹腔注射以無菌生理鹽水溶解的卵蛋白(50μg)和氫氧化鋁(2mg)混懸液0.2ml致敏，第25天予以1％卵蛋白滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連續(xù)3天，且于第13～25天開始捆綁固定小鼠，隔天一次，每次20分鐘;
　?。ǘ⒄?duì)照組(NC組):正常對(duì)照組(NC組):BALB/c小鼠分別于第4、11、18天腹腔注射以生理鹽水0.2ml致敏，且于第13～25天開始捆綁固定小鼠，隔天一次，每次20分鐘;第25天予以1％卵蛋白

7、麻醉后滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連續(xù)3天;
　?。ㄈ?、針刺模型組（ACA組）:氣道高反應(yīng)模型制作同氣道BHR組，且于第13天開始捆綁固定小鼠，針刺足三里(3mm)、大椎(3mm)，（參照針刺治療哮喘臨床選穴規(guī)律），平補(bǔ)平泄，隔天一次，每次20分鐘，（參照小鼠常用針灸穴位），共7次。于第4、11、18天腹腔注射以PBS溶解的卵蛋白50μg和氫氧化鋁2mg混懸液0.2ml致敏，第25天以1％卵蛋白在小鼠麻醉后滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連

8、續(xù)3天;
　　三組均于第28天行全身體積描記儀檢測(cè)Baseline Perth值，第29天取肺泡灌洗液及肺組織。
　　二、觀察指標(biāo)
　?。ㄒ唬?、各組小鼠一般情況;
　?。ǘ?、全身體積描記儀記錄乙酰甲膽堿(Methacholine，Mch)激發(fā)后BaselinePerth值;
　?。ㄈ?、用顯微鏡觀察肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid，BALF)中白細(xì)胞的分類和計(jì)數(shù);

9、>　?。ㄋ模?、用光學(xué)顯微鏡觀察肺組織病理切片中氣道與肺組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果:
　　一、正常對(duì)照組（NC組）BALB/c小鼠毛色光澤、體重增加、呼吸頻率及幅度正常;氣道高反應(yīng)模型組（BHR組）毛色失去光澤、體重減輕、精神較差、呼吸頻率增加、時(shí)伴有不同程度的呼吸困難;針刺模型組(ACA組)較BHR組癥狀減輕;
　　二、與NC組比較，BHR組氣道高反應(yīng)性在不同濃度Mch激發(fā)下明顯升高，當(dāng)Mch濃度大于3.12 mg/m

10、l后，氣道高反應(yīng)性明顯升高，且差異有顯著性(P＜0.01);ACA組與BHR組比較，氣道高反應(yīng)性降低，且乙酰甲膽堿濃度為6.25mg/ml、25mg/ml、50 mg/ml時(shí)，差異有顯著性P＜0.01）;
　　三、BHR組BALB/c小鼠的BALF中嗜酸性粒細(xì)胞（Eosnophils，EOS）計(jì)數(shù)大于NC組，ACA組小于BHR組(P＜0.01);與NC組比較，BHR組、ACA組中性粒細(xì)胞(Neutrophil，NEU)較正常組明顯

11、升高，且差異有顯著性(P＜0.01);與NC組比較BHR組、ACA組巨噬細(xì)胞(Macrophage，MOP)百分比降低，ACA組較BHR組降低幅度小，差異有顯著性（P＜0.05）;
　　四、BALB/c小鼠肺組織病理HE染色結(jié)果顯示NC組肺組織支氣管粘膜上皮細(xì)胞排列整齊，無明顯炎癥，支氣管內(nèi)清潔無明顯分泌物;BHR組支氣管上皮細(xì)胞可見局灶性脫落，皺折增多，粘膜充血水腫，支氣管管腔內(nèi)及肺間質(zhì)可見分泌物，EOS局灶性浸潤(rùn);ACA組支氣

12、管粘膜上皮細(xì)胞排列整齊，粘膜輕度充血，管腔內(nèi)見少許脫落上皮細(xì)胞。
　　結(jié)論:
　　祖國醫(yī)學(xué)傳統(tǒng)針刺療法對(duì)OVA致敏氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠的臨床癥狀、氣道高反應(yīng)性、肺組織病理性形態(tài)學(xué)有改善作用。
　　第二節(jié)針刺對(duì)氣道高反應(yīng)小鼠T淋巴細(xì)胞分化、Foxp3/RORγ t平衡的影響
　　目的:
　　一、觀察針刺對(duì)氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠T淋巴細(xì)胞分化的作用;
　　二、觀察針刺對(duì)氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠

13、Foxp3/RoRγt平衡的影響。
　　方法:
　　一、氣道高反應(yīng)模型的建立及分組:
　　SPF級(jí)BALB/c小鼠30只，6～8周，體重18～20g，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NC組)10只，氣道高反應(yīng)模型組（BHR組）10只，針刺模型組（ACA組）10只。
　?。ㄒ唬?、氣道高反應(yīng)模型組（BHR組）:參照文獻(xiàn)的方法BALB/c小鼠在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)三天，分別于第4、11、18天腹腔注射以無菌生理鹽水溶解的卵蛋白(50μg)和

14、氫氧化鋁(2mg)混懸液0.2ml致敏，第25天予以1％卵蛋白滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連續(xù)3天，且于第13～25天開始捆綁固定小鼠，隔天一次，每次20分鐘;
　?。ǘ?、正常對(duì)照組（NC組）:正常對(duì)照組（NC組）: BALB/c小鼠分別于第4、11、18天腹腔注射以生理鹽水0.2ml致敏，且于第13～25天開始捆綁固定小鼠，隔天一次，每次20分鐘;第25天予以1％卵蛋白麻醉后滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連續(xù)3天;
　?。ㄈ?、針

15、刺模型組（ACA組）:氣道高反應(yīng)模型制作同氣道BHR組，且于第13天開始捆綁固定小鼠，針刺足三里(3mm)、大椎(3mm)，（參照針刺治療哮喘臨床選穴規(guī)律），平補(bǔ)平泄，隔天一次，每次20分鐘，（參照小鼠常用針灸穴位），共7次。于第4、11、18天腹腔注射以PBS溶解的卵蛋白50μg和氫氧化鋁2mg混懸液0.2ml致敏，第25天以1％卵蛋白在小鼠麻醉后滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連續(xù)3天;三組均于第28天取材檢測(cè)。
　　二、觀察指標(biāo)

16、r>　?。ㄒ唬⑼ㄟ^流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)針刺介導(dǎo)OVA致敏氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠脾內(nèi)CD4+ CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和Th17細(xì)胞百分比;
　?。ǘ?、免疫組化檢測(cè)針刺對(duì)氣道高反應(yīng)CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3、RORγt蛋白表達(dá);
　?。ㄈ?、RT-PCR檢測(cè)肺組織中CD4+ CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3mRNA、RORγt mRNA表達(dá)。
　　結(jié)

17、果:
　　一、NC組相比，BHR組及ACA組BALB/c小鼠脾臟中CD4+ CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的百分比明顯下降(P＜0.01)，BHR組CD4+ CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的百分比ACA組下降更為明顯，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與NC組比較，BHR組及ACA組Th17細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比較正常對(duì)照組顯著升高(P＜0.01），ACA組CD4+T細(xì)胞的百分比較BHR組下降，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　二、

18、免疫組化檢測(cè)肺組織中RORγt、Foxp3蛋白表達(dá)結(jié)果:BHR組及ACA組BALB/c小鼠肺組織RORγt蛋白表達(dá)明顯高于NC組(P＜0.01)，ACA組蛋白表達(dá)水平降低，但仍高于正常對(duì)照組(P＜0.01); BHR組及ACA組BALB/c小鼠肺組織Foxp3蛋白表達(dá)明顯低于NC組(P＜0.01)，ACA組蛋白表達(dá)水平降低，且與BHR組比較差異有顯著性(P＜0.01)。
　　三、RT-PCR檢測(cè)肺組織中RORγt、Foxp3mRN

19、A表達(dá)結(jié)果:BHR組及ACA組BALB/c小鼠肺組織RORγtmRNA含量明顯高于NC組(P＜0.01)，ACA組RORγtmRNA含量較BHR組水平降低，但仍高于NC組(P＜0.01); BHR組及ACA組BALB/c小鼠肺組織Foxp3mRNAmRNA含量明顯低于NC組(P＜0.01)，ACA組Foxp3mmRNA含量與BHR組比較降低，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　一、OVA致敏氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠Treg/

20、Th17、Foxp3/RoRγt失衡，Treg/Th17、Foxp3/RoRγt失衡變化一致，且都與氣道高反應(yīng)呈負(fù)相關(guān);
　　二、傳統(tǒng)針刺療法可影響OVA致敏氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠T淋巴細(xì)胞分化，調(diào)節(jié)Treg/Th17失衡;
　　三、傳統(tǒng)針刺療法可調(diào)節(jié)OVA致敏氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠Foxp3/RoRγt失衡。
　　第三節(jié)針刺介導(dǎo)Notch對(duì)氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠FOXP3/RORγ t的作用
　　目

21、的:
　　一、探討Notch信號(hào)對(duì)氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠Foxp3/RoRγt失衡中的影響;
　　二、觀察針刺介導(dǎo)Notch信號(hào)在氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠Foxp3/RoRγt失衡中的作用。
　　方法:
　　一、氣道高反應(yīng)模型的建立及分組:
　　SPF級(jí)BALB/c小鼠30只，6～8周，體重18～20g，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NC組)10只，氣道高反應(yīng)模型組（BHR組）10只，針刺模型組（ACA組）10

22、只。
　?。ㄒ唬?、氣道高反應(yīng)模型組（BHR組）:參照文獻(xiàn)的方法BALB/c小鼠在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)三天，分別于第4、11、18天腹腔注射以無菌生理鹽水溶解的卵蛋白(50μg)和氫氧化鋁(2mg)混懸液0.2ml致敏，第25天予以1％卵蛋白滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連續(xù)3天，且于第13～25天開始捆綁固定小鼠，隔天一次，每次20分鐘;
　?。ǘ?、正常對(duì)照組（NC組）:正常對(duì)照組(NC組):BALB/c小鼠分別于第4、11、18天腹腔注

23、射以生理鹽水0.2ml致敏，且于第13～25天開始捆綁固定小鼠，隔天一次，每次20分鐘;第25天予以1％卵蛋白麻醉后滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連續(xù)3天;
　?。ㄈ⑨槾棠Ｐ徒M（ACA組）:氣道高反應(yīng)模型制作同氣道BHR組，且于第13天開始捆綁固定小鼠，針刺足三里(3mm)、大椎(3mm)，（參照針刺治療哮喘臨床選穴規(guī)律），平補(bǔ)平泄，隔天一次，每次20分鐘，（參照小鼠常用針灸穴位），共7次。于第4、11、18天腹腔注射以PBS溶解的

24、卵蛋白50μg和氫氧化鋁2mg混懸液0.2ml致敏，第25天以1％卵蛋白在小鼠麻醉后滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連續(xù)3天;
　　三組均于第28天取小鼠肺組織檢測(cè)。
　　二、觀察指標(biāo)
　?。ㄒ唬?、通過RT-PCR檢測(cè)肺組織中Notch1mRNA、Notch3mRNA、CSLmRNA的含量;
　?。ǘ?、Western blot檢測(cè)肺組織中Notch1、Notch3、CSL蛋白表達(dá)的變化，探討針刺對(duì)氣道高反應(yīng)小鼠Notc

25、h信號(hào)的影響。
　　結(jié)果:
　　一、RT-PCR檢測(cè)肺組織中Notch1 mRNA、Notch3mRNA、CSLmRNA的含量結(jié)果:BHR組Notch1mRNA的表達(dá)較正常對(duì)照組明顯升高(P＜0.01)，ACA組Notch1mRNA的表達(dá)較正常對(duì)照組升高(P＜0.05); BHR組、ACANotch3 mRNA的表達(dá)較NC組明顯降低(P＜0.01); CSLmRNA的表達(dá)三組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　二、Western

26、blot檢測(cè)肺組織中Notch1、Notch3、CSL蛋白表達(dá)結(jié)果:BHR組、ACA組Notch1蛋白的表達(dá)較正常對(duì)照組明顯升高(P＜0.01)，ACA組Notch1蛋白的表達(dá)較BHR組降低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01); BHR組、ACA組Notch3蛋白的表達(dá)較NC組明顯降低(P＜0.01)，ACA組組Notch3蛋白的表達(dá)較BHR組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);CSL蛋白的表達(dá)三組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論

27、:
　　一、Notch信號(hào)介導(dǎo)了BALB/c小鼠氣道高反應(yīng)的發(fā)生;
　　二、Notch1與BALB/c小鼠氣道高反應(yīng)呈正相關(guān)，與Foxp3/RoRγt比值呈負(fù)相關(guān);Notch3與BALB/c小鼠氣道高反應(yīng)呈負(fù)相關(guān)，與Foxp3/RoRγt比值呈正相關(guān)。
　　三、傳統(tǒng)針刺療法可影響OVA致敏氣道高反應(yīng)BALB/c小鼠Notch1、Notch3的表達(dá)。
　　第四節(jié)針刺通過Notch信號(hào)介導(dǎo)調(diào)節(jié)Foxp3/RoRγ t

28、平衡的機(jī)制
　　目的:
　　探討針刺通過Notch信號(hào)介導(dǎo)調(diào)節(jié)Foxp3/RoRγt平衡的機(jī)制。
　　方法:
　　一、氣道高反應(yīng)模型的建立及分組:
　　SPF級(jí)BALB/c小鼠18只，6～8周，體重18～20g，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(NC組)6只，氣道高反應(yīng)模型組（BHR組）6只，針刺模型組（ACA組）6只。
　?。ㄒ唬?、氣道高反應(yīng)模型組（BHR組）:參照文獻(xiàn)的方法BALB/c小鼠在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)三天，分別

29、于第4、11、18天腹腔注射以無菌生理鹽水溶解的卵蛋白(50μg)和氫氧化鋁(2mg)混懸液0.2ml致敏，第25天予以1％卵蛋白滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連續(xù)3天，且于第13～25天開始捆綁固定小鼠，隔天一次，每次20分鐘;
　?。ǘ⒄?duì)照組(NC組):正常對(duì)照組(NC組):BALB/c小鼠分別于第4、11、18天腹腔注射以生理鹽水0.2ml致敏，且于第13～25天開始捆綁固定小鼠，隔天一次，每次20分鐘;第25天予以1％卵

30、蛋白麻醉后滴鼻吸入激發(fā)，每日一次，連續(xù)3天;
　?。ㄈ?、針刺模型組（ACA組）:氣道高反應(yīng)模型制作同氣道BHR組，且于第13天開始捆綁固定小鼠，針刺足三里(3mm)、大椎(3mm)，（參照針刺治療哮喘臨床選穴規(guī)律），平補(bǔ)平泄，隔天一次，每次20分鐘，（參照小鼠常用針灸穴位），共7次。于第4、11、18天腹腔注射以PBS溶解的卵蛋白50μg和氫氧化鋁2mg混懸液0.2ml致敏，第25天以1％卵蛋白在小鼠麻醉后滴鼻吸入激發(fā)，每日一次

31、，連續(xù)3天;三組均于第28天取小鼠肺組織檢測(cè)。
　　二、觀察指標(biāo)
　　染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation，CHIP)實(shí)驗(yàn)確定RORγt、Foxp3與Notch的結(jié)合量。
　　結(jié)果:
　　一、BHR組BALB/c小鼠肺組織RORγtmRNA與Notch結(jié)合量明顯高于NC組，ACA組肺組織RORγtmRNA與Notch結(jié)合量水平降低，但仍高于NC組(P＜0.01); BHR組

32、BALB/c小鼠肺組織Foxp3mRNA與Notch結(jié)合量明顯低于NC組(P＜0.01），ACA組Foxp3mRNA與Notch結(jié)合量水平降低，且與高于BHR組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　二、Foxp3、RORγt與Notch的結(jié)合量的比值與肺組織中Foxp3/RORγt蛋白及基因的表達(dá)量的比值呈正相關(guān)。
　　結(jié)論:
　　針刺通過Notch信號(hào)調(diào)節(jié)氣道高反應(yīng)小鼠Foxp3/RoR平衡的作用可能是通過Notch信

33、號(hào)與CD4+ CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3、RORγt蛋白直接結(jié)合實(shí)現(xiàn)的。
　　第五節(jié)針刺對(duì)全麻誘導(dǎo)期患者血液動(dòng)力學(xué)及肺順應(yīng)性的影響
　　目的:
　　觀察針刺對(duì)全麻誘導(dǎo)期患者血液動(dòng)力學(xué)及肺順應(yīng)性的影響。
　　方法:
　　選取40例ASA分級(jí)為Ⅰ-Ⅱ級(jí)、年齡18-65歲、擬在氣管插管全身麻醉下實(shí)施擇期脊柱外科手術(shù)的患者。隨機(jī)分為兩組，每組20例。分別為針刺組（A組）在術(shù)前30m

34、in予2/15Hz疏密波電針刺激病人雙側(cè)內(nèi)關(guān)、曲池穴，刺激強(qiáng)度為電流0.5-1mA，時(shí)間為30分鐘;對(duì)照組（C組）未予電針刺激單純經(jīng)靜脈全麻誘導(dǎo)。觀察患者一般情況，血液動(dòng)力學(xué)指標(biāo)及肺通氣相關(guān)指標(biāo)。
　　結(jié)果:
　?。ㄒ唬┮话阗Y料比較兩組患者的性別構(gòu)成比、年齡、體重、身高差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　?。ǘ?、血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)兩組誘導(dǎo)后的心率、血壓和RPP值都較入室后基礎(chǔ)值及誘導(dǎo)前明顯下降(P＜0.05)，插管即

35、刻、插管后1 min的心血管指標(biāo)較誘導(dǎo)后明顯增高(P＜0.05)。兩組插管后RPP的值均較誘導(dǎo)后值顯著升高，但A組RPP增高持續(xù)的時(shí)間較C組短。且A組插管后10minRPP值較C組低(P＜0.05)。
　?。ㄈ┓瓮庀嚓P(guān)指標(biāo)兩組患者插管后插管即刻(T4)、氣管插管后2min(T5)、10 min(T6)、20 min(T7)Pplat沒有明顯變化;T4、T5、T6 Ppeak沒有明顯變化，T7時(shí)間點(diǎn)A組Ppeak較C組及T4時(shí)間