糖尿病胃輕癱大鼠胃Cajal間質(zhì)細(xì)胞鈣通道和細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子的變化.pdf

1、糖尿病病人常存在整個(gè)胃腸道運(yùn)動(dòng)異常。在口服降糖藥的1型或2型患者大約30％～50％發(fā)生胃神經(jīng)肌肉功能不全，即糖尿病性胃輕癱（Diabetic Gastroparesis，DGP）。糖尿病胃輕癱的發(fā)病機(jī)制至今仍不完全清楚，但許多研究發(fā)現(xiàn)糖尿病胃輕癱存在著明顯的胃電節(jié)律異常。慢波是胃肌電活動(dòng)的起步電位，決定著胃收縮的頻率、速度與方向，是胃動(dòng)力的基礎(chǔ)。目前認(rèn)為Cajal間質(zhì)細(xì)胞是胃腸道運(yùn)動(dòng)的起博細(xì)胞，產(chǎn)生并傳導(dǎo)慢波活動(dòng)至胃腸平滑肌。ICC自發(fā)

2、活動(dòng)的產(chǎn)生和傳播受到離子環(huán)境、神經(jīng)遞質(zhì)和激素等生物活性物質(zhì)的影響，許多離子包括鈣、鉀、鈉及氯離子等與其相關(guān)，尤其是鈣離子。
　　目的：本研究利用糖尿病大鼠建立胃電節(jié)律異常模型，采用全細(xì)胞膜片鉗及免疫組化激光共聚焦顯微鏡等技術(shù)研究糖尿病胃輕癱大鼠ICC細(xì)胞鈣通道電流及細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化，為其發(fā)病機(jī)制提供依據(jù)。
　　材料與方法：健康SD大鼠隨機(jī)分為糖尿病組和正常對(duì)照組。糖尿病組采用一次大劑量腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）制備大

3、鼠糖尿病模型，原代培養(yǎng)正常和糖尿病性胃輕癱大鼠Cajal間質(zhì)細(xì)胞，運(yùn)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，在電壓鉗制模式下記錄單個(gè)Cajal間質(zhì)細(xì)胞的鈣內(nèi)向電流的變化；激光共聚焦方法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的變化。
　　結(jié)果：1.糖尿病胃輕癱大鼠胃ICC細(xì)胞鈣通道電流較正常值I-V曲線上移，各測(cè)試電壓下電流均小于正常水平。正常組最大激活電壓為0 mV，糖尿病胃輕癱大鼠變?yōu)榧s-10mV，翻轉(zhuǎn)電位從35mV變?yōu)?2mV，穩(wěn)態(tài)激活曲線右移；2.糖尿病胃輕癱

4、大鼠胃ICC細(xì)胞內(nèi)Ca2+熒光強(qiáng)度（863±25.1）高于正常組（196.7±7.9），鈣離子濃度增高。
　　結(jié)論：1.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，糖尿病胃輕癱大鼠ICC鈣通道內(nèi)向電流明顯小于正常組，穩(wěn)態(tài)失活曲線右移，即向去極化方向移動(dòng)，說(shuō)明糖尿病胃輕癱的情況下，ICC鈣通道內(nèi)向電流不但減小，且激活過(guò)程延遲；鈣電流電壓曲線上移，翻轉(zhuǎn)電位減小，可能使ICC的可興奮性降低；2.糖尿病胃輕癱大鼠細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的相對(duì)熒光值明顯增強(qiáng)，提示糖尿病胃輕癱大