α1A受體拮抗劑坦索羅辛在男性節(jié)育中的研究.pdf

1、研究背景：
　　 目前，男性避孕藥分為2類，即激素類和非激素類。男性激素類避孕藥能夠可逆性地抑制精子生成,從而達(dá)到避孕目的，但是，長(zhǎng)期應(yīng)用會(huì)引起各種全身性不良反應(yīng)的發(fā)生。非激素類避孕藥包括作用于睪丸（如棉酚）、附睪、精子動(dòng)力、精子卵子融合的藥物以及拮抗配子或激素的疫苗。但是截止目前為止，仍未有安全有效的非激素避孕藥可用，而棉酚也僅處于第二階段的研究。
　　 α1-腎上腺素受體拮抗劑目前已廣泛應(yīng)用于治療由良性前列腺增生引起

2、的下尿路癥狀，并已經(jīng)應(yīng)用到慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛綜合征和尿路結(jié)石的治療中。由于α1-腎上腺素受體拮抗劑的適應(yīng)癥已擴(kuò)展至更年輕的人群，因此它的不良反應(yīng)，特別是射精功能障礙受到了越來越多的關(guān)注。在一組研究中，口服坦索羅辛病人有1.6％發(fā)生射精功能障礙，而服用西洛多辛病人有22.3％發(fā)生射精功能障礙。在另一項(xiàng)臨床研究中，坦索羅辛使6名實(shí)驗(yàn)對(duì)象的射精量減少80％，其中5名實(shí)驗(yàn)對(duì)象顯示無精子癥。根據(jù)Hellstrom的研究，坦索羅辛可導(dǎo)致健康

3、男性精子密度和精子總數(shù)的減少。
　　 精子運(yùn)輸是通過由交感神經(jīng)系統(tǒng)支配的α1-腎上腺素受體介導(dǎo)的生殖道平滑肌的收縮完成的。α1-腎上腺素受體分為3個(gè)亞型，即α1A-、α1B-和α1D-腎上腺素受體。α1-腎上腺素受體在人類精囊中的分布:α1A為75.0±4.0％，α1B為11.7±3.1％，α1D為13.3±1.5％。而在人類射精管中，α1-腎上腺素受體的三種亞型的表達(dá)比值為97∶0∶3。α1A-腎上腺素受體也是前列腺平滑肌的主

4、要亞型，主要介導(dǎo)前列腺平滑肌的收縮。因此，阻斷α1A-腎上腺素受體可能抑制精囊和射精管平滑肌的收縮，防止精子運(yùn)輸，從而達(dá)到避孕的目的。到目前為止，通過干擾精子在生殖道內(nèi)的運(yùn)輸以達(dá)到避孕目的的研究鮮有報(bào)道。坦索羅辛導(dǎo)致的射精功能障礙最初被認(rèn)為是由于膀胱頸口松弛所致的逆行性射精引起的，但是最近泌精障礙被認(rèn)為是主要原因?？傊?，不管是逆行性射精，還是泌精障礙，都為α1-腎上腺素受體拮抗劑作為一種男性避孕藥的創(chuàng)新性應(yīng)用提供了寶貴的線索。截至目前為

5、止，尚未有探討坦索羅辛作為一種避孕藥的應(yīng)用研究。鑒于以上問題，構(gòu)成本研究的設(shè)計(jì)思路和研究目的。
　　 研究目的：
　　 探討α1A-腎上腺素受體拮抗劑坦索羅辛作為一種潛在的男性避孕藥應(yīng)用的有效性和安全性。
　　 研究對(duì)象與方法：
　　 40名健康男性受試者被納入研究。臨床評(píng)估包括他們的健康狀況，伴發(fā)疾病、藥物使用史以及性欲等。禁欲3天后，在給予坦索羅辛或安慰劑之前，應(yīng)用精子質(zhì)量分析儀對(duì)所有受試者進(jìn)行常規(guī)精

6、液分析。
　　 我們按依次交叉的方式給予安慰劑和坦索羅辛(單次口服劑量為0.4mg或0.8mg)，以消除藥物和劑量間的偏倚。所有受試者隨機(jī)分為2組（A組和B組）。A組依次給予安慰劑、0.4mg坦索羅辛和0.8mg坦索羅辛，B組按相反地順序給予藥物。每次給藥之間有7天的間歇期。每次給藥后4～6小時(shí)，通過手淫的方式取精，以評(píng)估每個(gè)受試者的射精情況，包括常規(guī)精液分析和射精后中段尿中的精子數(shù)量。同時(shí)記錄性欲和坦索羅辛的不良反應(yīng)。在間歇期

7、內(nèi)，每次給藥前或每次收集精液前3天都不允許有包括手淫在內(nèi)的性活動(dòng)發(fā)生。
　　 結(jié)果：
　　 所有受試者在服用0.8mg坦索羅辛后均發(fā)生了干燥射精;服用0.4mg的坦索羅辛后，有功能的精子總數(shù)顯著減少。6名受試者表示服用0.8mg的坦索羅辛后出現(xiàn)可忍受的不適，其中1名受試者表示出現(xiàn)眼瞼下垂、2名出現(xiàn)鼻塞、3名出現(xiàn)乏力。癥狀在服藥10小時(shí)后消失。
　　 結(jié)論：
　　 (1)坦索羅辛可導(dǎo)致男性射精異常;

8、　　 (2)坦索羅辛與男性射精異常存在劑量相關(guān)性。0.4mg的坦索羅辛使有功能的精子總數(shù)顯著減少;0.8mg的坦索羅辛?xí)?dǎo)致干燥射精，并伴有短暫的不良反應(yīng)。
　　 (3)α1A-腎上腺素受體拮抗劑坦索羅辛在將來可能成為一種男性避孕藥，需進(jìn)一步研究證實(shí)。
　　 第二部分α1A受體拮抗劑坦索羅辛在雄性大鼠節(jié)育中的機(jī)制研究
　　 研究背景及目的：
　　 在過去的50年間，盡管女性避孕方法有了顯著的進(jìn)步，但是世

9、界人口數(shù)仍在繼續(xù)快速地增長(zhǎng)，人口過剩問題成為造成全球環(huán)境破壞和人民苦難的主要根源。因此，目前很有必要增加更多有效的避孕方法來解決這個(gè)問題。而在針對(duì)美國(guó)及其他地區(qū)的調(diào)查中，發(fā)現(xiàn)包括輸精管結(jié)扎術(shù)和男性避孕套在內(nèi)的男性避孕方法幾乎占了所有避孕方法的1/3。因此，發(fā)展男性避孕藥成為一種新的趨勢(shì)。
　　 理想的男性避孕藥應(yīng)該具備的特點(diǎn)為:①高效性，②很少的副作用，③容易服用，④可逆性。迄今為止，尚未有理想男性避孕藥問世。眾所周知，男性射精

10、過程包括3階段，即泌精、射精和膀胱頸口的關(guān)閉。這3個(gè)連續(xù)的生理過程受交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)的精細(xì)調(diào)節(jié)，特別有賴于交感神經(jīng)和α1A受體功能的完整性。阻滯α1A-R即可抑制這一過程，可能導(dǎo)致射精障礙發(fā)生。因此，α1A受體拮抗劑作為男性避孕藥的應(yīng)用是男性節(jié)育的新領(lǐng)域。
　　 α1受體是一種Ca2+活化G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)，可激活細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，從而介導(dǎo)一系列生理和病理生理過程。α1受體可分為α1A、α1B、α1D三種亞型，

11、各具不同藥理學(xué)特性。在男性生殖系統(tǒng)中α1受體各亞型的分布和功能各有不同。
　　 射精障礙包括逆向射精和泌精障礙兩種表現(xiàn)形式。MarcoGrasso報(bào)道口服α1A受體拮抗劑因?yàn)樗沙诎螂最i口出現(xiàn)逆向射精;而不同文獻(xiàn)報(bào)道口服α1A受體拮抗劑所致射精障礙并非逆向射精，而是松弛生殖管道平滑肌所致的泌精障礙。男性口服超選擇性α1A受體拮抗劑坦索羅辛及西羅多辛出現(xiàn)射精障礙的幾率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于α1-受體拮抗劑阿呋唑嗪、哌唑嗪。
　　 我們前期

12、已行臨床試驗(yàn)，單次口服不同劑量的α1A受體拮抗劑坦索羅辛，測(cè)得0.8mg坦索羅辛后4～6小時(shí)可達(dá)到射精時(shí)完全無精液射出，且射精活動(dòng)后第一次中段尿液測(cè)精液數(shù)量為零，7天后射精活動(dòng)、精液恢復(fù)正常。說明坦索羅辛所致射精障礙為泌精障礙而非逆向射精。以此為基礎(chǔ)，本研究以雄性大鼠為研究對(duì)象，進(jìn)一步探討α1A受體拮抗劑坦索羅辛抑制射精的機(jī)制，為臨床探索α1A受體拮抗劑作為男性避孕藥方面提供理論依據(jù)和寶貴線索。
　　 研究方法：
　　

13、1.α1A受體拮抗劑坦索羅辛對(duì)大鼠輸精管組織內(nèi)α1A、α1B、α1D受體的表達(dá)水平的影響Wistar雄性大鼠24只，隨機(jī)分為4組，每組6只，每日一次定時(shí)給予生理鹽水或不同劑量坦索羅辛（分別為3ug/kg，6ug/kg，12ug/kg）灌胃，灌胃時(shí)間1月共30次。然后，解剖其輸精管，提取輸精管組織內(nèi)的蛋白。采用Westernblot檢測(cè)不同劑量坦索羅辛對(duì)大鼠精管組織內(nèi)α1A、α1B、α1D受體的表達(dá)水平的影響。
　　 2.α1A受

14、體拮抗劑坦索羅辛對(duì)大鼠輸精管收縮活動(dòng)的影響Wistar雄性大鼠24只，隨機(jī)分為4組，每組6只，每日一次定時(shí)給予生理鹽水或不同劑量坦索羅辛(分別為3ug/kg，6ug/kg，12ug/kg)灌胃，灌胃時(shí)間1周共7次。然后，解剖其輸精管，連接張力換能器，記錄給予去甲腎上腺素后，輸精管的收縮曲線并記錄收縮峰值與基線的差值。
　　 3.α1A受體拮抗劑坦索羅辛對(duì)大鼠射精功能的影響將24只健康雄鼠隨機(jī)分為3組，即實(shí)驗(yàn)組A3、B3和對(duì)照組C

15、3。實(shí)驗(yàn)組A38只雄性Wistar鼠每日灌服坦索羅辛(6ug/kg)，實(shí)驗(yàn)組B3每日灌服坦索羅辛（12ug/kg），對(duì)照組C3灌服生理鹽水(3ml)。1周后，將其與雌鼠交配，收集大鼠的精液后立即進(jìn)行計(jì)數(shù)分析，檢查大鼠的精液量、精子密度，從而估算精子總數(shù)。
　　 結(jié)果：
　　 Westernblot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，服用α1A受體拮抗劑坦索羅辛后，α1A受體的表達(dá)水平增高，且為劑量依賴性;而α1B、α1D受體的表達(dá)水平未見類似變化

16、。根據(jù)灰度值分析坦索羅辛對(duì)α1A受體表達(dá)水平的影響，A1組和D1組（對(duì)照組）的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.05;A1組和B1組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05;A1組和C1組的差異具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜0.01。
　　 在連續(xù)給予坦索羅辛（α1A受體拮抗劑）1周后，離體情況下，大鼠輸精管對(duì)去甲腎上腺素的反應(yīng)性明顯降低，隨著劑量的增加，反應(yīng)減弱。
　　 灌服坦索羅辛（α1A受體拮抗劑）1周后，將雌雄小鼠同籠交配，收集雄

17、鼠的精液行計(jì)數(shù)分析，C3組（對(duì)照組）的平均精子總數(shù)為18.95±8.40×106，A3組為11.68±3.69×106，B3組為4.91±2.81×106/L。經(jīng)過比較發(fā)現(xiàn)，A3組、B3組、C3組之間比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05，見圖2-5)，且呈劑量依賴性。
　　 結(jié)論：
　　 (1)α1A受體拮抗劑可選擇性的阻斷α1A受體的作用，對(duì)α1B、α1D受體的表達(dá)水平影響不大，且這種阻斷作用具有劑量-效應(yīng)作用;