顱腦創(chuàng)傷后腦脊液瘦素水平變化機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察顱腦創(chuàng)傷后腦脊液中瘦素水平的變化；建立兔腦右側(cè)液壓沖擊創(chuàng)傷模型，動態(tài)觀察兔顱腦創(chuàng)傷后血清瘦素、生長激素、胰島素樣生長因子-1的水平及腦脊液中瘦素的水平變化，并用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PolymeraseChainReaction，PCR)檢測創(chuàng)傷腦組織與對側(cè)正常腦組織中瘦素mRNA的表達(dá)，熒光標(biāo)記瘦素示蹤實驗，觀察單純性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者血清與腦脊液瘦素水平變化，探討顱腦創(chuàng)傷后腦脊液瘦素水平升高變化的原因，以及顱腦創(chuàng)傷后其變化與

2、發(fā)生異位骨化的意義。
　　方法：第一部分，76只新西蘭大白兔隨機(jī)分為顱腦創(chuàng)傷組(A組、C組、E組)和假手術(shù)組(B組、D組、F組)，顱腦創(chuàng)傷組建立兔腦單側(cè)液壓打擊創(chuàng)傷模型，于右頂開一直徑7mm骨窗，予以保持硬膜完整，連接液壓打擊器行液壓打擊。假手術(shù)組只按照同樣方法打開7mm骨窗，不進(jìn)行液壓打擊。A組(17只)和B組(8只)于傷后1d、3d、7d清晨空腹?fàn)顟B(tài)下取耳緣靜脈靜脈血2ml，以及通過小腦延髓池穿刺留取腦脊液0.5ml，用酶聯(lián)免

3、疫吸附測定法(enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)檢測血清瘦素、生長激素、胰島素樣生長因子-1及腦脊液瘦素水平。分別比較顱腦創(chuàng)傷組與假手術(shù)組各時間點血清瘦素、生長激素和胰島素樣生長因子-1的濃度及腦脊液瘦素水平變化。C組(9只)和D組(6只)麻醉滿意后，行血管內(nèi)注射外源性人工熒光標(biāo)記的兔瘦素，并給與液壓打擊及假手術(shù)操作，收集傷后30min兔血清與腦脊液，用ELISA法測量分析其中瘦素水平的變化趨勢

4、，并取雙側(cè)兔腦組織行冰凍切片，熒光顯微鏡下觀察，比較鏡下顱腦創(chuàng)傷組和假手術(shù)組腦組織熒光范圍比較。E組(18只)和F組(18只)分別于打擊后1d、3d、7d，取傷側(cè)與正常側(cè)兔腦組織-80℃保存，并用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PolymeraseChainReaction，PCR)檢測創(chuàng)傷腦組織與對側(cè)正常腦組織中瘦素mRNA的表達(dá)。
　　第二部分，選取30例男性單純性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者(G組)，分別于傷后1d、3d、7d抽取空腹腔靜脈血2m

5、1和腰穿留取腦脊液2ml，對照組(H組)為男性排除腦外傷、出血、神經(jīng)腫瘤、炎癥的神經(jīng)內(nèi)科住院患者的腦脊液30例。應(yīng)用ELISA方法檢測血清與腦脊液瘦素水平，分析比較各時間點瘦素水平，G組血清與腦脊液瘦素水平變化相關(guān)性。
　　結(jié)果：新西蘭兔顱腦創(chuàng)傷組(A組)傷后1d、3d和7d血清瘦素、生長激素、胰島素樣生長因子-1水平均高于假手術(shù)組(B組)(P<0.05)；A組腦脊液瘦素水平傷后1d、3d和7d均高于B組(P<0.05)；A組傷后

6、1d血清中瘦素與腦脊液瘦素呈正相關(guān)(P<0.05)，其他時間點均不相關(guān)。
　　顱腦創(chuàng)傷組(C組)打擊側(cè)腦組織在熒光顯微鏡下，可見到熒光顯影，且多于C組正常側(cè)與假手術(shù)組(D組)的雙側(cè)腦組織。顱腦創(chuàng)傷組(E組)腦組織的瘦素打擊后1d、3d、7d的PCR表達(dá)均與假手術(shù)組(F組)比較無統(tǒng)計學(xué)差別(P>0.05)。
　　男性蛛網(wǎng)膜下腔出血患者(G組)腦脊液中瘦素水平逐漸下降趨勢，但與對照組(H組)仍較高。腦脊液中瘦素水平的升高與血清中

7、瘦素水平相關(guān)性分析，出血后第1d成正相關(guān)性(P<0.05)，余無統(tǒng)計學(xué)差別(P>0.05)。
　　結(jié)論：我們研究發(fā)現(xiàn)顱腦創(chuàng)傷后血清瘦素水平、生長激素水平、IGF-1水平、腦脊液中瘦素水平均是升高的；血液中瘦素可以通過血管破裂隨血液直接漏入蛛網(wǎng)膜下腔，進(jìn)入腦脊液循環(huán)；亦可能顱腦創(chuàng)傷后血腦屏障通透性增加，使血液中瘦素滲透入腦組織增加而引起；腦脊液中瘦素升高主要是血管源性的瘦素進(jìn)入腦脊液循環(huán)通路引起的，并非腦組織自身分泌合成增加引起腦脊