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文檔簡(jiǎn)介
1、慢性胰腺炎(chronic pancreatitis CP)是在各種復(fù)雜原因的作用下所造成的胰腺組織及其功能的持續(xù)性損傷,與急性胰腺炎相比,慢性胰腺炎的基本特點(diǎn)為胰腺組織的基本結(jié)構(gòu)發(fā)生永久性不可逆性改變以及廣泛的組織纖維化。慢性胰腺炎在西方國(guó)家是一種多發(fā)病,在我國(guó)發(fā)病率比較低,但近年來(lái)發(fā)病率也有上升的趨勢(shì)。明確慢性胰腺炎發(fā)病機(jī)制有助于慢性胰腺炎的早期診斷及治療。近年來(lái)的研究相繼發(fā)現(xiàn)了胰蛋白酶原基因(PRSS-1)突變、囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)
2、調(diào)節(jié)基因(CFTR)突變與某些類(lèi)型慢性胰腺炎的發(fā)病相關(guān),證實(shí)了基因多態(tài)性是慢性胰腺炎發(fā)病的危險(xiǎn)因素。
目的:本研究通過(guò)分析絲氨酸蛋白酶抑制劑Kazal1型(SPINK1)基因N34S突變?cè)诼阅懺葱砸认傺?、慢性酒精性胰腺炎、慢性特發(fā)性胰腺炎和自身免疫性胰腺炎患者中的發(fā)生率,對(duì)各組基因突變情況與正常對(duì)照組突變情況進(jìn)行比較,探討SPINK1基因突變對(duì)不同類(lèi)型慢性胰腺炎易感性的影響,研究該基因突變是否為慢性胰腺炎發(fā)病的危險(xiǎn)因素。
3、進(jìn)一步驗(yàn)證和探討慢性胰腺炎發(fā)病的分子機(jī)制。
方法:在患者知情同意的情況下,采集2010年-2012年河南省人民醫(yī)院明確診斷的79例慢性胰腺炎住院患者血液標(biāo)本,其中包括慢性膽源性胰腺炎27例,慢性酒精性胰腺炎23例,慢性特發(fā)性胰腺炎24例,自身免疫性胰腺炎5例,同時(shí)采集60例健康對(duì)照者的血液標(biāo)本,提取基因組DNA,應(yīng)用PCR技術(shù)對(duì)SPINK1基因進(jìn)行擴(kuò)增、酶切,觀察DNA片段多態(tài)性,并選取病例組及體檢對(duì)照組目的基因分別進(jìn)行測(cè)
4、序,觀察堿基突變情況。
結(jié)果:患者組及對(duì)照組139份標(biāo)本共檢測(cè)到6例SPINK1基因N34S突變,其中24例特發(fā)性胰腺炎檢測(cè)出4例,突變發(fā)生率為16.7%,27例膽源性胰腺炎檢測(cè)出該基因突變1例,突變發(fā)生率為3.7%,23例酒精性胰腺炎檢出1例,突變發(fā)生率為4.3%,5例自身免疫性胰腺炎未檢出該基因突變,60例健康對(duì)照組也沒(méi)有檢出該基因突變。PCR-RFLP電泳結(jié)果顯示由于突變的存在,使突變基因產(chǎn)生了新的限制性?xún)?nèi)切酶酶切位
5、點(diǎn),突變組基因被切為大小不同的兩個(gè)片段,凝膠電泳圖上出現(xiàn)新的條帶。選取其中突變病例突變基因及正常對(duì)照基因進(jìn)行測(cè)序,發(fā)現(xiàn)SPINK1基因第101位存在A→G的突變,突變組雜合株的測(cè)序圖上出現(xiàn)兩個(gè)熒光條帶。
結(jié)論:從總體上看,慢性胰腺炎患者組SPINK1基因N34S突變率為7.6%,高于健康對(duì)照組,從不同的慢性胰腺炎類(lèi)型來(lái)看,特發(fā)性胰腺炎發(fā)生基因突變發(fā)生率與正常組對(duì)照差異最為顯著,而膽源性胰腺炎、酒精性胰腺炎和自身免疫性胰腺炎
6、患者該突變與健康對(duì)照組沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
意義:近年來(lái),國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)慢性胰腺炎的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行了深入的研究,相繼發(fā)現(xiàn)了一些基因突變?nèi)缫鹊鞍酌冈?PRSS-1)突變、囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)基因(CFTR)突變、絲氨酸蛋白酶抑制劑KazalⅠ型(SPINKl)基因等與某些類(lèi)型慢性胰腺炎的發(fā)病相關(guān),證實(shí)了基因多態(tài)性是慢性胰腺炎發(fā)病的危險(xiǎn)因素。日本及歐洲學(xué)者對(duì)慢性特發(fā)性胰腺炎及慢性酒精性胰腺炎研究較多,而在我國(guó)占多數(shù)的慢性膽源性胰
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