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文檔簡介
1、高血壓是心血管疾病的一個(gè)重要的危險(xiǎn)因素,但也是主要的可控危險(xiǎn)因子。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)是調(diào)整血壓的主要因素,抑制ACE的活性會(huì)降低血壓。本文以水牛乳為原料制備降血壓肽,并研究酶解液的熱穩(wěn)定性和酸堿穩(wěn)定性。
選用胃蛋白酶等6種蛋白酶酶解脫脂水牛乳,篩選出胃蛋白酶為試驗(yàn)最佳用酶。在此基礎(chǔ)上,采用單因素和正交試驗(yàn),考察了酶解時(shí)間、初始酶用量、初始底物濃度、酶解溫度
2、和pH值對酶解工藝的影響,得到最佳酶解工藝條件為:溫度為39℃,時(shí)間為3h,pH為3.0,底物濃度為1.5%,加酶量為8000 U·g-1。0.1 mg·mL-1多肽濃度條件下,此時(shí)酶解產(chǎn)物的ACE抑制率為55.2%,水解度為17.4%。此時(shí)酶解液的ACE抑制率可達(dá)60.7%,水解度為15.8%。
用胃腸道模擬試驗(yàn)和穩(wěn)定性試驗(yàn)考察胃腸道酶、溫度和pH對酶解液的ACE抑制活性穩(wěn)定性的影響,結(jié)果表明:水牛乳蛋白胃蛋白酶酶解液具
3、有良好的胃蛋白酶耐受性;在3≤pH≤8的環(huán)境下,水牛乳蛋白胃蛋白酶酶解液的ACE抑制活性具有良好的酸堿穩(wěn)定性;在T≤60℃的環(huán)境下,水牛乳蛋白胃蛋白酶酶解液的ACE抑制活性具有良好的熱穩(wěn)定性。
采用超濾技術(shù)分離和富集酶解液,結(jié)果顯示:酶解液經(jīng)10 KDa和5 KDa的超濾膜超濾后,分子量大于10 kDa的肽分子物質(zhì)基本被截留。分子量小于5 kDa的肽分子物質(zhì)經(jīng)富集后,在第3組份中的含量提高到88.6%;超濾后,分子量為5~
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