食源性降血壓肽的評價方法

1、 www． c h i n a d a i r y ． n e tr p g y @c h i n a j o u r na 1 ． n e t ． c n中國乳 品工業(yè) d a , ／ r yI N D U S T R Y食源性降血壓肽的評價方法 蔣菁莉 ， 任發(fā)政 ( 中 國農 業(yè) 大 學 食 品 科 學 與 營 養(yǎng) 工 程 學 院 ， 北 京 1 0 0 0 8 3 )摘 要 ： 對食 源性 降血壓肽的體外活性測定方法、 動物實

2、驗評價方- ； - L - ~A． 體 臨床試驗的研究狀況及進展 等進行 了論述 。關鍵詞 ： 降血壓肽 ； 血管緊張素轉化酶抑制劑 ； 評價 方法 中圖分類號 ： Q5 1 6文獻標識碼 ： B文章編號 ： 1 0 0 1 — 2 2 3 0 ( 2 0 0 6 } 0 6 — 0 0 3 6 — 0 4D e t e r m i n a t i o nm e t h o d so fa nt i h y pe r t e n s i

3、 V ep e pt i d e sd e r i v e df r o m f o o dJ I A NGJ i n g — l i ， R E N F a — z h e n g( Co l l e g eo fF o o dS c i e n c ea n dNu t r i t i o n a lE n g i n e e r i n g ， Ch i n aAg r i c u l t u r a lUn i v e r

4、 s i t y ， B e i j i n g10 0 0 8 3)Ab s t r a c t ： A n g i o t e n s i n —Ic o n v e r t i n ge n z y me ( A CE ) p l a y sama j o rr o l ei nt h ec a r d i o v a s c u l a rh o me o s t a s i s ， mo s to ft h ef o o d

5、— d e r i v e dp e p t i d e sf i m c t i o na s a n t L h y p e r t e n s i v ea g e n t sb yi n h i b i t i n gt heACEa c t i v i W． Th ea r t i c l eo v e r v i e w a b o u tt her e s e a r c hc o n d i t i o na n d

6、t hed e v e l o p me n to ft hed e t e r mi n a t i o nme t h o d so fa n t i h y p e r t e m i v ep e p t i d e s ， i nc l u d in ge v a lu a t e dt heACEi n h i b i t o r ya c t i v i t yi n v i t r o ， i nv i v oa n

7、de v a l u a t e dt hea n -t i h y p e r te n s i v ee f e c ti n c l i n i c a 1．Ke yw o r d s ： a n t i h y p e r t e n s i v ep e p t i d e ； a n g i o t e n s i n — — Ic o n v e r t i n ge n z y mei n h i b i t o r

8、； d e t e r mi n a t i o nme t ho d0引 言 高 血 壓 是 最 常 見 的 心 血 管 疾 病 ． 是 目前 全 球 范 圍 內 的 重 大 公 共 衛(wèi) 生 問 題 。 根 據 世 界 衛(wèi) 生 組 織 預 測 ， 至 2 0 2 0 年 ， 非 傳 染 性 疾 病 將 占我 國 死 亡 原 因 的 7 9 ％， 其 中 心 血 管 病 將 占 首 位 『 1 1 ， 因 此 ， 高 血 壓 疾 病 的

9、 預 防 和 治 療 工 作 尤 為 重 要 化 學 合 成 的 抗 高 血 壓 藥 物 在 高 血 壓 治 療 中 的 作 用 得 到 了 醫(yī) 學 界 的 普 遍 認 可 ， 但 其 存 在 對 人 體 的 副 作 用 ，使 研 究 者 開 始 尋 找 安 全 性 更 高 的 藥 物 。同 時 ． 隨 著 人 們 對 自身 健 康 意 識 的 不 斷 增 強 ， 醫(yī) 務 人 員 和 患 者 都 傾 向 于 高 血 壓 的 非 藥

10、物 治 療 。 近 年 來 ， 研 究 發(fā) 現 天 然 食 物 蛋 白質 經 體 外 酶 解 或 體 內 消 化 酶 解 后 ， 產 生 具 有 特 殊 生 理 功 能 的 活 性 肽 。 來 源 于 食 物 蛋 白質 的 生 物 活 性 肽 越 來 越 引 起 有 識 人 士 的 重 視 ． 特 別 是 具 有 降 血 壓 活 性 的 多 肽 成 為 生 物 活 性 肽 研 究 的 熱 點 之 一 。在 研 究 開 發(fā) 食 物 蛋

11、 白來 源 的 降 血 壓 活 性 多 肽 過 程 中 ．建 立 有 效 的 評 價 多 肽 降 血 壓 活 性 方 法 是 關 鍵 。本 文 論 述 了 目前 降 血 壓 活 性 多 肽 研 究 中 常 用 的 評 收 稿 日期 ： 2 0 0 6 — 0 4 — 1 3基 金項 目： “ 十五 ” 奶業(yè)專項基金資助項 目( 2 0 0 2 B A 5 1 8 A 一 0 5 )作 者簡介 ： 蔣 菁莉 ( 1 9 7 9 一) ，

12、女 ， 博 士研究 生 ， 研究 方 向為功能 乳制 品加 工。． 歲價 方 法 ， 旨在 促 進 我 國 食 源 性 降 血 壓 肽 的 研 究 開 發(fā) 。1血 管 緊 張 素 轉 化 酶 ( ACE) 對 血 壓 的 調 節(jié) 作 用 機 理 原 發(fā) 性 高 血 壓 發(fā) 病 病 因 和 機 制 復 雜 ． 目前 尚未 完 全 闡 明 ， 一 般 認 為 高 血 壓 并 非 單 一 因 素 引 起 ． 而 是 由 多 種 因 素 綜 合

13、 影 響 造 成 的 。其 中 ， 腎 索 一血 管 緊 張 素 系 統 ( RAS ) 是 體 內 重 要 的 血 壓 調 控 系 統 ， 直 接 參 與 血 管 收 縮 、 代 謝 及 交 感 神 經 的 調 節(jié) 。I K AS 由 血 管 緊 張 素 原 、ACE、 及 血 管 緊 張 素 受 體 組 成 。 腎 素 是 由 腎 小 球 血 管 極 球 旁 裝 置 分 泌 的 一 種 肽 ． 入 血 后 能 將 血 管 緊 張

14、素 原 水 解 為 血 管 緊 張 素 I ( An gI) ，后 者 經 肺 循 環(huán) 中 的 ACE 作 用 轉 化 為 血 管 緊 張 素 Ⅱ( An gⅡ ) 。 An gⅡ是 RAS的 主 要 介 質 ， 有 強 烈 的縮 血 管 和 升 壓 效 應 ． 并 能 促 進 腎 上 腺 皮 質 球 帶 釋 放 醛 固 酮 。 增 加 鈉 在 腎 遠 小 管 的 重 吸 收 ， 使 血 容 量 增 加 。 血 壓 升 高 1 3

15、1 。 在 激 肽 釋 放 酶 一 激 肽 系 統 ( KKS) 中 ， 激 肽 通 過 作 用 于 血 管 內 皮 的 緩 激 肽 受 體 促 進 一 氧 化 氮 和 前 列 腺 素 等 血 管 擴 張 因 子 的 釋 放 ．促 進 血 壓 下 降 [ 4 1 。ACE在 KKS 系 統 中 被 稱 為 激 肽 酶 Ⅱ．使 激 肽 失 活 ， KKS 系 統 處 于 抑 制 狀 態(tài) ．導 致 血 管 收 縮 血 壓 升 高 。 ACE

16、酶 在 RAS 和 K _ KS 系 統 中 發(fā) 揮 調 節(jié) 血 壓 的 重 要 作 用 維普資訊 http://www.cqvip.com 專題論述 Mo n o g r a p h sACE酶 水 解 ． 表 現 弱 的 ACE 抑 制 活 性 ， 第 三 種 是 前 體 型 ． 肽 被 AcE 水 解 或 經 胃 腸 道 消 化 后 表 現 出 強 的ACE抑 制 活 性 第 一 種 類 型 和 第 三 種 類 型 的 肽 在

17、動 物 實 驗 中 具 有 降 血 壓 活 性 機 體 內血 壓 的 調 控 與 多 種 因 素 相 關 ． 而 降 血 壓 肽 的 體 外 檢 測 只 是 以ACE酶 的 抑 制 活 性 為 指 標 為 此 有 學 者 認 為 ． 一 些 活 性 肽 動 物 降 血 壓 試 驗 和 體 外 AcE抑 制 活 性 I C 值 不 一 致 ， 可 能 與 降 血 壓 肽 的 作 用 靶 標 和 體 內 代 謝 有 關 ． 并 提 出

18、 建 立 與 血 壓 調 控 相 關 的 酶 及 受 體 的 體 外 檢 測 方 法 ．如 中性 內 肽 酶 、內皮 素 轉 化 酶 、血 管 緊 張 素 Ⅱ受 體 和 內 皮 素 受 體 等 ，檢 測 多 肽 對 這 些 酶 及 受 體 的 抑 制 作 用 ． 多 方 面 評 價 活 性 多 肽 的 功 能 4臨 床 試 驗 降 血 壓 肽 在 人 體 內 功 f i l g ／ ~驗 研 究 是 食 源 性 降 血 壓 肽 的 研

19、究 重 點 但 是 降 血 壓 肽 或 含 降 血 壓 的食 品 在 人 體 中 的 功 能 研 究 十 分 缺 少 ( 見 表 1 ) 。S e k i y a 等 1 2 0 ] 首 次 通 過 人 體 試 驗 表 明 ，高 血 壓 患 者 自愿 者 每 日攝 人 2 0g酪 蛋 白 的 胰 蛋 白 酶 水 解 產 物 ． 可 以 降 低 收 縮 壓 和 舒 張 壓 Ha t a 等 『 2 1 J 通 過 雙 盲 實 驗 證 明

20、， 中度 高 血 壓 患 者 自愿 者 每 日服 用 9 5mL的 發(fā) 酵 乳 飲 料 Ca l p i s ． 服 用 4 周 和 8 周 后 ． 收 縮 壓 分 別 降 低 1 2 5 3 ． 2 2 6 8P a 和 1 8 7 9 ． 8 4 0 2P a ， 第 8周 舒 張 壓 下 降 9 1 9 ． 9 2 1 8P a ． 而 服 用 酸 化 牛 乳 的 對 照 組 血 壓 值 沒 有 變 化 。兩 組 自愿 者 的 心

21、 律 、 體 重 、 血 清 HDL和 甘 油 三 酯 等 生 理 指 標 無 差 異 。 自愿 者 在 停 止 服 用 Ca l p i s 后 ， 血 壓 值 能 保 持 4 周 不 上 升 。許 多 學 者 對 富 含 三 ~ k I p p和VP P 的 酸 乳 進 行 多 次 高 血 壓 人 群 試 驗 ． 受 試 人 群 未 服 用 高 血 壓 藥 物 ． 結 果 表 明 該 種 酸 乳 可 以適 度 改 善 的 高 血

22、壓 患 者 的 血 壓 2 3 ]表 1發(fā)酵 乳飲料和乳源 多肽的降血壓 功能人群試驗『 1 引法 。 研 究 體 外 試 驗 和 體 內 試 驗 的 關 系 ， 建 立 有 效 的 降 血 壓 肽 體 外 活 性 檢 測 方 法 ． 將 有 利 于 廣 泛 篩 選 具 有 降 壓 活 性 的 食 源 性 生 物 活 性 多 肽 。參 考 文 獻 ：【 1 】 中國高血壓預 防指南 ( 試行本 ) U ] ． 高血壓雜志 ， 2 0

23、0 0 ， 8 ( 1 ) ： 9 4 — 1 0 2 ．【 2 】 殷曉峰 ， 胡 剛 ， 汪海． 血壓調控機制 與抗 高血壓藥物靶標U 】 l 中 國藥理 學通報 ． 2 0 0 3 ． 1 9 ( 9 ) ： 9 7 1 - 9 7 5 ．【 3 】O P A R I LS ， ME N GO C ， S UNSC ， e ta 1 ． V a s c u l a rE n d o t h e l i u m：R e s p o

24、 n s et oI n j u r y [ M] ． P l e n u m ， N e wY o r k ， 1 9 8 6 ： 2 0 5 ．【 4 】 E R DO SEG ， S K I D G E LRA ． T h ea n g i o t e n s i n —Ic o n v e r t i n ge n z y m eU 】 _ L a b ． I n v e s t ， 1 9 8 7 ， 5 6 ： 3 4 5

25、— 3 4 8 ．【 5 】 C US H MA NDW， O N DE T T IM A ． D e s i g no fp o t e n tc o m p e t i t i v ei n h i b i t i o no fa n g i o t e n i n c o n v e r t i n ge r ~ m e U ] ． B i o c h e m ． ， 1 9 7 7 ， 1 6 ： 54 8 4 —54 8 8

26、．【 6 】OI NGCM，S UZ A NN EO．P u r i f i c a t i o na n da s s a ym e mo & f o ra n g i o t e n s i n — c o n v e r t i n ge n z y m e Ⅱ 】 ． JC h r o m a t o g r a p h y ， 1 9 9 6 ， 7 4 3A ，1 0 5 -1 2 2 ．【 7 】C US H MA

27、 NDW，C H E U NGHS ． S p e c t r o p h o t o m e t r i ca s s a ya n dp r o p e r t i e so ft h ea n g i o ~ n s i n — Ic o n v e r t i n ge n z y m eo fr a b b i tl u n g 0 ] ．Bi o c he m． Ph a r ma c o l ， 1 9 7 1 ， 2 0

28、 ：16 3 7 —16 4 8 ．【 8 】V E R ME I R S S E NV ， C A MPVJ ， V E K S T R A E T EW ． O p t i m i s a t i o na ndv a l i d a t i o no fa n a n g i o t e n s i n —Ic o n v e r t i n ge n z y mei n h i b i t i o na s s a yf o

29、rt h es c r e e n i n go fb i o a c t i v ep e p t i d e sU 】 _ JB i o c h e m．B i o p h y s ．M e t h o d s ， 2 0 0 0 ， 5 1 ， 75 —8 7．【 9 】WA T A N A B ET ，MA Z UMD E KTK ，N A G A Is ， e ta 1 ． A n a l ysme t ho do ft he

30、A n g i o t e n s i n — Ic o n v e r t i n ge n z y mei n h i b i t o r ya c t i v i t yb a s e do nm i c e l l a re l e c t r o k i n e t i cc h r o m a t o g r a p h y [ J ] ． A n a l y t i c a lS c i e n c e ，2 0 0 3

31、． 1 9 ： 1 5 9 -1 61 ．不 同 的 研 究 者 進 行 的 人 群 試 驗 中 ． 得 到 一 個 重 要 結 果 是 服 用 特 異 的 酶 水 解 產 物 或 發(fā) 酵 乳 產 品 對 正 常 人 群 的 血 壓 值 沒 有 影 響 目前 關 于 降 血 壓 肽 的 人 群 實 驗 ． 尚沒 有 負 面 效 果 的 報 道 。5結 束 語 綜 上 所 述 。 評 價 食 物 來 源 的 多 肽 是 否 具 有 降 血

32、 壓 的 功 能 ． 人 體 試 食 試 驗 和 臨 床 觀 察 是 最 客 觀 的評 價 方 【 1 0 】H O L MQ UI S TB ，B U NN I NGP ，R ． I O R DA NJF ．Ac o n t i n uo u ss p e c t r o p h ot o me t r i ca s s a yf ora n g i o t e n s i nc o n v e r t i n ge n z y me

33、 [ J ] ． A n a 1B i o c h e m ． 1 9 7 9 ． 9 5 ： 5 4 0 — 5 4 8 ．【 1 1 】 鄭建仙． 功能性食品( 第三卷) 【 M】 ． 北 京： 中國輕工業(yè)出版社 ，1 9 9 9 ： 4 6 9 -4 7 2 ．[ 1 2 】 杜冠華 ， 李學軍， 張永祥， 等譯． 藥理學實驗指南—— 新藥 的發(fā)現和藥理學評價Ⅱ 】 ． 北京： 科學技術 出版社 ， 2 0 0 1 ： 6 3 -

34、 6 4 ．【 1 3 】D A V I SM E ， R AOA ， G A UT H I E KS ， e ta 1 ． E n z y m a t i ct r e a t m e n to fwh e yp r o t e i nf o rt hep r o d u c t io no fa n t i h y p e r t e n s i v ep e p t i d e s ，t h er e s u ltp r o d

35、 u c t sa n dt r e a t m e n to f h y p e r t e n s i o ni nm a m m a l s 【 P 】 ． wo0 1 ／ 8 5 9 8 4A 1 ， 2 0 0 1 ．【 14 】R ． OD N E YJI ， WHI T EJ ， C H A N R． T h ei n f l u e n c eo fr e s t r a i n to nb l o o dp r e

36、s s u r ei nt her a t [ J ] ． JP h a r m ma c o l o g i c a lTo x i c o l o g i c a l M e t ho&，1 9 9 7 ， 3 8 ： 1 5 7 —1 6 2 ．【 15 】 K I C H A R DJF ， B R I A NAM， D A N I E LJW． T h ee m e r g i n gr o l eo fd a j

37、r yp r o t e i n sa ndb i o a c t i v ep e p t i d e si nn u t r i t i o na n dh e a l t h[ J ] ． JNu t r ，2 0 0 4 ， 1 3 4 ( 4 ) ： 9 8 0 — 9 8 8 ．【 1 6 ]N A K A MU R AY ， Y A MA MOT ON ， S A K A IK ， e ta 1 ． P u r i f i

38、 c a t i o na n dc h a r a c t e r i z a t i o no fA n g i o t e n s i n — Ic o n v e r t i n ge n z y mei n h i b i t o r sf r o mas o u rm i ~ l J ] ． JD a i r yS c i ， 1 9 9 5 ， 7 8 ： 7 7 7 — 7 8 3 ．【 1 7 】 MA E N OM，