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文檔簡介
1、目的:研究X-線照射對小鼠肺組織中Foxp3和TGF-β1表達的影響,分析Foxp3和TGF-β1的表達水平變化的意義,進一步探討X-線照射對肺組織炎癥和免疫微環(huán)境的影響及其臨床意義。
方法:將 8周齡雌性C57/BL6 小鼠隨機分為實驗組和對照組,實驗組小鼠接受12Gy6MV-X線胸部照射,對照組小鼠不接受照射。在照射后的每個時間點(1、6、12、24、72h 及2、4、8、24w),各組均處死3只小鼠。小鼠處死后右肺組
2、織立刻置于-80℃冰箱保存,左肺組織4%多聚甲醛固定24h后制作石蠟標本。用RT-PCR法檢測Foxp3和TGF-β1基因的表達情況;采用Western blot 法檢測Foxp3和RORγt 蛋白的表達水平;Masson 染色了解肺部纖維化情況,免疫組化技術檢測經(jīng)X-線照射后不同時間點肺組織內Foxp3表達的變化。
結果:
1.實驗組小鼠經(jīng)X-線照射后Foxp3 mRNA表達水平下降,其中以6h、24h、7
3、2h、2w、4w和8w 較為明顯。Foxp3 蛋白表達水平也有不同程度的下降,與對照組相比,實驗組在照射后6h、24h、72h、8w 時降低較明顯。免疫組化結果顯示Foxp3 主要定位于細胞核和細胞質中,分布于淋巴細胞中。實驗組Foxp3表達下降,實驗組免疫組化評分(3.48±1.05)與對照組(5.89±1.53)比較,有顯著性差異(P<0.05)。實驗組在照射后6h、24h和4w 時Foxp3 較對照組表達降低,差別有顯著統(tǒng)計學意義
4、(P<0.01),實驗組在照射后1h、12h、24w與對照組相應時間點相比較,F(xiàn)oxp3表達降低,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
2.實驗組肺組織TGF-β1 mRNA水平在照射后6h、12h、2w和4w時的表達水平明顯高于對照組相應的時間點。
3.RORγt在照射組和對照組均表達。
4.Masson染色顯示,實驗組小鼠經(jīng)X-線照射后于24w時可以觀察到肺間隔纖維化。
結論:<
5、br> 1.實驗組小鼠胸部經(jīng)X-線照射后,肺組織Foxp3在mRNA和蛋白水平表達下降,表明X-線照射對Foxp3的表達具有一定下調的作用。
2.實驗組小鼠胸部經(jīng)X-線照射后,肺組織TGF-β1 mRNA水平表達高于對照組,Masson 染色結果顯示實驗組小鼠胸部經(jīng)X-線照射后于24w 時可以觀察到肺泡間隔纖維化,進一步驗證了TGF-β1與放射性肺纖維化的關系。
3.胸部X-線照射肺組織Foxp3的表達
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