NF-κB介導(dǎo)Bex2對(duì)腦膠質(zhì)瘤增殖的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：本研究在前期發(fā)現(xiàn)Bex2促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)上，重點(diǎn)探討其促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的具體機(jī)制，為膠質(zhì)瘤的分子靶向治療提供潛在的靶點(diǎn)。
　　方法：1.在體外培養(yǎng)的U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，通過(guò)LipofectamineTM-2000分別轉(zhuǎn)染Bex2的過(guò)表達(dá)質(zhì)?；蛘遱iRNA，運(yùn)用RT-PCR、Western blot(WB)等方法檢測(cè)過(guò)表達(dá)和干擾效果；CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。2.U251細(xì)胞中干擾或者過(guò)表達(dá)Bex2后，RT-P

2、CR、WB檢測(cè)p65/NF-κB的核酸及蛋白水平的變化；WB檢測(cè)ERK活性水平(p-ERK)；3.在體外培養(yǎng)的U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，過(guò)表達(dá)p65或用siRNA下調(diào)p65表達(dá)，運(yùn)用RT-PCR、WB等方法檢測(cè)過(guò)表達(dá)和干擾效果；CCK-8法檢測(cè)U251細(xì)胞增殖情況；WB檢測(cè)p-ERK的變化。4.U251細(xì)胞中干擾p65后，RT-PCR、WB檢測(cè)Bex2核酸及蛋白水平的變化。
　　結(jié)果：1.在U251細(xì)胞中下調(diào)Bex2后細(xì)胞增殖能力明顯

3、下降，過(guò)表達(dá)Bex2產(chǎn)生相反的結(jié)果。2.過(guò)表達(dá)Bex2后，p65核酸及蛋白水平均增加，p-ERK水平增高。3.下調(diào)Bex2表達(dá)后，p65核酸及蛋白水平降低，活性(p-p65水平)降低，p-ERK水平降低。4.過(guò)表達(dá)p65后，U251細(xì)胞增殖能力明顯升高；p-ERK水平增高。5.下調(diào)p65后細(xì)胞增殖能力明顯下降；p-ERK減少。6.下調(diào)p65表達(dá)后，Bex2核酸及蛋白水平均沒(méi)有變化。
　　結(jié)論：在U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，Bex2促進(jìn)p