腫瘤浸潤(rùn)調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞與胰腺癌進(jìn)展及預(yù)后的相關(guān)性研究.pdf

1、背景/目的:胰腺癌的發(fā)病率和死亡率逐年升高,目前排名腫瘤導(dǎo)致死亡因素第四位,據(jù)統(tǒng)計(jì)每年約有227,000人死于胰腺癌。由于胰腺癌早期難以發(fā)現(xiàn),導(dǎo)致手術(shù)切除率和預(yù)后也遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于其它腫瘤,因此針對(duì)胰腺癌的抗腫瘤免疫研究逐漸成為大家關(guān)注的熱點(diǎn)。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Foxp3+Treg細(xì)胞)能抑制相關(guān)T淋巴細(xì)胞的功能,如CD8+毒性T淋巴細(xì)胞等,從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視。目前僅有少部分文獻(xiàn)運(yùn)用流式細(xì)胞儀技術(shù)報(bào)道了 Treg細(xì)胞在胰

2、腺導(dǎo)管腺癌患者外周血單核細(xì)胞中的頻率以問題,但很少有相關(guān)研究詳細(xì)探討并分析Treg細(xì)胞可能在胰腺導(dǎo)管腺癌腫瘤微環(huán)境中對(duì)相關(guān)T淋巴細(xì)胞的影響以及Treg細(xì)胞的表達(dá)和分布與胰腺導(dǎo)管腺癌分化、預(yù)后的關(guān)系。在本研究中,我們將闡述胰腺導(dǎo)管腺癌微環(huán)境中Treg細(xì)胞的表達(dá)與相關(guān)T淋巴細(xì)胞亞群及腫瘤分化、預(yù)后的關(guān)系。
　　材料及方法:從2007年1月到2012年1月總共有228名在西南醫(yī)院治療的胰腺導(dǎo)管腺癌患者和15名對(duì)照樣本被納入本研究。其中4

3、5名胰腺導(dǎo)管腺癌患者的外周血及腫瘤組織被收集。通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血和腫瘤微環(huán)境中 Treg細(xì)胞,CD4+ T淋巴細(xì)胞及CD8+ T淋巴細(xì)胞的頻率。此外收集了183名胰腺導(dǎo)管腺癌的組織樣本,通過連續(xù)石蠟切片運(yùn)用免疫組化的方法分析了Foxp3, CD4和CD8等細(xì)胞因子的表達(dá)。最后運(yùn)用t檢驗(yàn),卡方檢驗(yàn),相關(guān)性分析,生存曲線等研究T淋巴細(xì)胞亞群在胰腺癌組織中的頻率、分布、相關(guān)性以及和胰腺癌進(jìn)展、預(yù)后的關(guān)系。
　　結(jié)果:通過流式細(xì)胞儀

4、檢測(cè)發(fā)現(xiàn),與作為對(duì)照的正常胰腺組織比較,胰腺導(dǎo)管腺癌微環(huán)境中和外周血單核細(xì)胞中的Treg細(xì)胞,CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞的頻率均明顯增高。但健康對(duì)照樣本的外周單核細(xì)胞與胰腺癌患者外周單核細(xì)胞中的Treg細(xì)胞,CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞表達(dá)頻率沒有明顯差別。相應(yīng)地,在胰腺導(dǎo)管腺癌微環(huán)境中,Treg細(xì)胞和CD4+ T淋巴細(xì)胞的表達(dá)頻率呈正相關(guān),而Treg細(xì)胞和CD8+ T淋巴細(xì)胞的表達(dá)頻率呈負(fù)相關(guān)。同時(shí)通過流式細(xì)胞儀

5、技術(shù)研究發(fā)現(xiàn), Treg細(xì)胞的表達(dá)和胰腺導(dǎo)管腺癌的分化程度密切相關(guān)。運(yùn)用免疫組化染色研究發(fā)現(xiàn),在胰腺導(dǎo)管腺癌腫瘤為環(huán)境中,Treg細(xì)胞的表達(dá)主要分布于胰腺癌細(xì)胞周圍的間質(zhì)區(qū)域并高于遠(yuǎn)離胰腺癌細(xì)胞的外周間質(zhì)區(qū)域。相反的,CD8+T淋巴細(xì)胞則主要集中表達(dá)位于遠(yuǎn)離胰腺癌細(xì)胞的外周間質(zhì)區(qū)域而腫瘤周圍間質(zhì)區(qū)域表達(dá)較少。最后我們發(fā)現(xiàn)胰腺導(dǎo)管腺癌患者較高的腫瘤分化程度和較早的腫瘤分期以及高表達(dá)的CD8+ T淋巴細(xì)胞與良好的生存率密切相關(guān),而較高表達(dá)的

6、 Foxp3+ T淋巴細(xì)胞的表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān),并且Foxp3+T淋巴細(xì)胞的表達(dá)是一個(gè)導(dǎo)致預(yù)后不良的獨(dú)立因素。
　　結(jié)論:在胰腺導(dǎo)管腺癌腫瘤微環(huán)境中,CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的頻率顯著增加,這些細(xì)胞的表達(dá)抑制了腫瘤相關(guān)抗原特異性的CD8+ T細(xì)胞的募集和表達(dá)。此外,增加的腫瘤浸潤(rùn)Treg細(xì)胞的頻率與胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞的分化程度相關(guān)且提示預(yù)后不良。大多數(shù)的Foxp3+細(xì)胞被發(fā)現(xiàn)募集于低分化的胰腺導(dǎo)管腺癌的腫瘤細(xì)胞間質(zhì)