靈芝總?cè)茖?duì)鵝膏中毒小鼠所致肝損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、蘑菇中毒主要是由鵝膏肽類(lèi)毒素所引起，目前尚缺少有效的治療鵝膏中毒的藥物，前期研究表明靈芝具有很好的治療效果，為此本論文擬探討靈芝的有效成分——靈芝總?cè)茖?duì)鵝膏毒肽中毒小鼠所致肝損傷的保護(hù)作用及其抗氧化機(jī)理研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1、靈芝總?cè)频奶崛〖捌浼兓?運(yùn)用二氧化碳超臨界提取法進(jìn)行粗提，靈芝子實(shí)體打粉，以95％乙醇作為夾帶劑，萃取條件:溫度40℃;壓力35MPa;耗時(shí)2.5小時(shí);CO2流量為35g/min;夾帶劑和粉末的體積

2、/重量比為6∶1(mL/g)。超臨界萃取率為2.42％。再將超臨界提取物進(jìn)行硅膠柱層析進(jìn)一步分離，流動(dòng)相為不同比例的氯仿、甲醇混合溶液。目的產(chǎn)物主要集中在前兩個(gè)洗脫比例的流動(dòng)相，其中氯仿∶甲醇比例為98∶2組分所得產(chǎn)物重量為6.333g;氯仿∶甲醇比例為96∶4組分所得產(chǎn)物重量為6.912g。
　　2、靈芝總?cè)茖?duì)鵝膏毒肽中毒治療預(yù)實(shí)驗(yàn):分別設(shè)置正常對(duì)照組、鵝膏毒肽中毒組、高低劑量靈芝總?cè)平M、水飛薊賓組和純橄欖油組，以確定靈芝總

3、三萜對(duì)鵝膏毒肽中毒的治療效果。靈芝總?cè)齐S機(jī)選取高劑量(200mg/kg/day)和低劑量(50mg/kg/day)兩個(gè)組作為實(shí)驗(yàn)組，總?cè)迫苡谑秤眉?jí)橄欖油中。結(jié)果表明靈芝總?cè)平o藥組均表現(xiàn)出一定的藥效，而最佳劑量還需要接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。此外純油組的各項(xiàng)生化指標(biāo)均于中毒組相比無(wú)明顯差異，故能排除掉橄欖油可能帶來(lái)的影響。
　　3、不同劑量靈芝總?cè)茖?duì)α-鵝膏毒肽中毒小鼠的肝損傷保護(hù)作用研究。設(shè)置正常組、鵝膏毒肽中毒組、純油組和不同

4、劑量純化靈芝總?cè)铺幚斫M（劑量分別為25、50、100、200、400mg/kg/day,橄欖油溶解為懸濁液，灌胃處理）。結(jié)果說(shuō)明靈芝總?cè)茖?duì)α-鵝膏毒肽所致肝損傷的保護(hù)效果在一定的范圍內(nèi)呈現(xiàn)劑量的正相關(guān)性，并隨著劑量的增加（25mg/kg/day到200mg/kg/day），血清和肝勻漿中的各項(xiàng)指標(biāo)更接近于正常組。當(dāng)劑量達(dá)到100mg/kg/day和200mg/kg/day時(shí)，血清中轉(zhuǎn)氨酶活性(ALT、AST)和肝勻漿內(nèi)各項(xiàng)指標(biāo)(SO

5、D、CAT、MDA)均與中毒組相比改善最為明顯。
　　4、不同給藥時(shí)間靈芝總?cè)茖?duì)α-鵝膏毒肽中毒小鼠肝損傷保護(hù)作用研究。設(shè)置正常組、鵝膏中毒組和靈芝總?cè)撇煌瑫r(shí)間給藥組（依次在注射毒素后0h、1h、2h、3h、4h、5h給藥），靈芝總?cè)乒辔竸┝窟x擇200mg/kg/day。結(jié)果表明在中毒之后越早給藥，相應(yīng)的治療效果越好，即血清中各項(xiàng)酶的指標(biāo)和肝勻漿中各項(xiàng)生化指標(biāo)越接近正常組的水平，尤以0小時(shí)組的效果最佳，這說(shuō)明在生活中出現(xiàn)鵝膏

6、菌中毒后盡早送醫(yī)治療是至關(guān)重要的。
　　5、在α-鵝膏毒肽致死劑量下對(duì)正常組、中毒組、靈芝總?cè)平M和水飛薊賓組的小鼠存活情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，經(jīng)120小時(shí)觀(guān)察，正常組小鼠全部存活，中毒組死亡率卻高達(dá)96.67％，而靈芝總?cè)平o藥組和水飛薊賓對(duì)照組的死亡率則分別為46.67％和56.67％，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明靈芝總?cè)茖?duì)鵝膏中毒有較好的解毒效果。
　　總之，靈芝總?cè)茖?duì)α-鵝膏毒肽中毒引起的肝損傷表現(xiàn)出有效的保護(hù)作用，且呈現(xiàn)出一定的劑量