依達(dá)拉奉在大鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注后海馬遲發(fā)性神經(jīng)元死亡和遠(yuǎn)期記憶功能中的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、第一部分
　　 研究目的：依達(dá)拉奉已作為一種自由基清除劑用于科研和臨床。然而目前對(duì)它的研究主要集中在對(duì)腦血管病急性期缺血中心區(qū)以及周圍缺血半暗帶的保護(hù)作用上，對(duì)于遠(yuǎn)離缺血區(qū)的海馬部位稍晚發(fā)生的神經(jīng)損傷和遠(yuǎn)期的認(rèn)知障礙尚未見相關(guān)報(bào)道。在本部分研究中，將探討依達(dá)拉奉在局部腦缺血后海馬遲發(fā)性神經(jīng)元死亡和遠(yuǎn)期認(rèn)知功能中的作用。
　　 研究方法：本部分研究將Wistar 大鼠分為三組：假手術(shù)組（該組大鼠接受手術(shù)但控制線栓進(jìn)入長(zhǎng)度，

2、實(shí)際并不堵塞大腦中動(dòng)脈入口）；缺血組（該組利用線栓堵住大鼠大腦中動(dòng)脈入口）；依達(dá)拉奉干預(yù)組（該組大鼠在再灌注后立即以及再灌注30分鐘后分別經(jīng)尾靜脈注射一次依達(dá)拉奉，劑量為3mg/kg）。采用線拴法制作大鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型。尼式染色和TUNEL 染色方法觀察再灌注3,7,30天后海馬CA1 區(qū)神經(jīng)元缺失和凋亡情況，水迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)試再灌注30天后大鼠學(xué)習(xí)記憶功能。
　　 研究結(jié)果：缺血再灌注3天，7天，30天缺血組較假手術(shù)組海

3、馬CA1 區(qū)神經(jīng)元發(fā)生明顯的缺失和凋亡，依達(dá)拉奉干預(yù)后海馬CA1 區(qū)神經(jīng)元缺失和凋亡情況明顯減輕。缺血組動(dòng)物再灌注30天后與假手術(shù)組動(dòng)物比較學(xué)習(xí)記憶能力下降，水迷宮實(shí)驗(yàn)潛伏期明顯延長(zhǎng)，呆在目標(biāo)象限的時(shí)間比例明顯縮短，依達(dá)拉奉干預(yù)后學(xué)習(xí)記憶能力提高，水迷宮實(shí)驗(yàn)潛伏期明顯縮短，呆在目標(biāo)象限的時(shí)間比例明顯延長(zhǎng)。
　　 研究結(jié)論：本部分研究表明依達(dá)拉奉可以減輕大腦中動(dòng)脈缺血再灌注海馬遲發(fā)性神經(jīng)元死亡，保護(hù)遠(yuǎn)期認(rèn)知功能不受損害。
　

4、　 第二部分
　　 研究目的：局灶性腦缺血后的海馬遲發(fā)性神經(jīng)元死亡（DND）的機(jī)理目前尚不十分明確。研究發(fā)現(xiàn)依達(dá)拉奉可以減輕大腦中動(dòng)脈缺血再灌注海馬的遲發(fā)性神經(jīng)元死亡。本部分將進(jìn)一步對(duì)依達(dá)拉奉這種保護(hù)作用機(jī)制進(jìn)行研究。
　　 研究方法：線栓法制備大鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型。分別于再灌注3,7,30天后測(cè)定同側(cè)海馬丙二醛(MDA)，超氧化物歧化酶(SOD)含量；ELISA 及RT-PCR方法測(cè)定再灌注3,7,30天后同

5、側(cè)海馬IL-1β，TNF-α蛋白和mRNA 水平表達(dá)量；TUNEL+GFAP 免疫熒光雙標(biāo)觀察再灌注3,7,30天后海馬CA1 區(qū)神經(jīng)元凋亡情況和星型細(xì)胞活化情況；Western blot分析再灌注3,7,30天后同側(cè)海馬GFAP表達(dá)量。
　　 研究結(jié)果：MCAO后第3天和第7天，缺血組的大鼠同側(cè)海馬的較假手術(shù)組相比MDA 含量顯著增加，SOD 活力明顯下降，IL-1β和TNF-α的蛋白表達(dá)量及mRNA 水平表達(dá)量明顯增加，3m