姜黃素對自發(fā)性高血壓大鼠腦缺血再灌注后海馬神經(jīng)元凋亡的影響及機制.pdf

1、目的:觀察自發(fā)性高血壓大鼠海馬神經(jīng)元的改變及姜黃素對其腦缺血再灌注后海馬神經(jīng)元凋亡的影響及其可能的保護機制。
　　 方法:雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠60只,隨機分為2組:假手術(shù)組(W-Sham組)和全腦缺血再灌注組(W-I/R組)；SHR120只,隨機分為4組:假手術(shù)組(S-Sham組)、全腦缺血再灌注組(S-UR組)、姜黃素100mg/kg預(yù)處理組(PreS-Cur組),于缺血前1 h腹腔給藥和姜黃素100mg

2、/kg后處理組(PostS-Cur組),于缺血再灌注后30min腹腔給藥。上述實驗組按再灌注2 h、6 h、1d、3 d、7 d五個時間點再分為五個亞組。采用4-VO法建立大鼠全腦缺血再灌注模型,于缺血再灌注各時間點處死,每組6只大鼠。制備大鼠腦石蠟標本,采用TUNEL法檢測海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的凋亡情況；免疫組化法測定海馬CA1區(qū)p-c-jun、c-fos、caspase-12和caspase-3的表達水平；于再灌注7d時觀察行為學(xué),然

3、后處死。
　　 結(jié)果:
　　 1.行為學(xué):兩種大鼠假手術(shù)組學(xué)習、記憶能力無差別(P>0.05),I/R后學(xué)習、記憶能力下降；I/R后SHR學(xué)習能力、記憶能力較WKY大鼠下降(P<0.05)；與S-I/R組比較,姜黃素預(yù)/后處理組學(xué)習能力和記憶能力改善(P<0.05)。
　　 2.海馬神經(jīng)元凋亡計數(shù):W-Sham組海馬CA1區(qū)有極少量TUNEL陽性神經(jīng)元分布,與之相比,S-Sham組CA1區(qū)可見較多量的陽性神經(jīng)元(

4、P<0.05)。S-I/R組海馬CA1區(qū)TUNEL陽性神經(jīng)元在再灌注2h即可見較多表達,至1d達高峰,7d恢復(fù)至2h水平；而W-I/R組3天達高峰,7d恢復(fù)至2h水平。與Sham組相比,兩種大鼠I/R組各時點陽性細胞數(shù)增加(P<0.05)。與W-I/R組相比,S-I/R組在各再灌注點陽性細胞數(shù)顯著增加(P<0.05)；姜黃素預(yù)/后處理組海馬CA1區(qū)TUNEL陽性細胞數(shù)較S-I/R組明顯減少(P<0.05)。
　　 3.海馬p-c

5、-jun表達:與W-Sham組相比,S-Sham組p-c-Jun蛋白表達增加(P<0.05)。全腦IR后2h P-C-Jun蛋白表達開始增加,再灌注后1d達峰值水平,后逐漸降低。各時間點S-I/R組p-c-Jun蛋白表達比W-I/R組增加(P<0.05),與Sham組相比,兩種大鼠IR組p-c-Jun表達增加(P<0.05)。姜黃素預(yù)/后處理組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細胞核中p-c-Jun蛋白的表達較S-I/R組明顯減少(P<0.05)。

6、r>　　 4.海馬c-fos表達:W-Sham組海馬CA1區(qū)有極少量的c-Fos蛋白表達,S-Sham組與之相比各時點c-Fos蛋白表達增加(P<0.05)。全腦IR后2h c-Fos蛋白表達開始增加,再灌注后3d達峰值水平,后逐漸降低。各時間點S-I/R組c-Fos蛋白表達比W-I/R組增加(P<0.05),與Sham組相比,兩種大鼠I/R組c-Fos表達增加(P<0.05)。姜黃素預(yù)/后處理組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細胞核中c-Fos蛋

7、白的表達較S-I/R組明顯減少(P<0.05)。
　　 5.海馬caspase-12、caspase-3表達:與W-Sham組相比,S-Sham組各時點海馬CA1區(qū)caspase-12、caspase-3蛋白表達增加(P<0.05)。全腦I/R后2hcaspase-12、caspase-3蛋白表達開始增加,再灌注后1d達峰值水平,后降至基礎(chǔ)水平。各時間點S-I/R組caspase-12、caspase-3蛋白表達高于W-FR組(

8、P<0.05):與Sham組相比,兩種大鼠IR組caspase-12、caspase-3蛋白表達增加(P<0.05)。與S-I/R組相比,姜黃素預(yù)/后處理組各時間點海馬CA1區(qū)神經(jīng)元細胞中caspase-12、caspase-3蛋白的表達明顯減少(P<0.05)。
　　 結(jié)論:SHR海馬神經(jīng)元凋亡數(shù)目增加,JNK下游物質(zhì)c-jun、c-fos及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡通路caspase-12、caspase-3的表達上調(diào)；I/R后通過增強