楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪細(xì)胞分化與防治肥胖機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)(細(xì)胞培養(yǎng))研究楂曲平胃散抑制小鼠前脂肪細(xì)胞分化的作用及分子調(diào)控機(jī)制。通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)(動(dòng)物實(shí)驗(yàn))研究楂曲平胃散預(yù)防小鼠肥胖和治療肥胖小鼠的作用，并探討其作用機(jī)制是否與其抑制前脂肪細(xì)胞分化的作用有關(guān)。 方法：(1)體外實(shí)驗(yàn)：加入楂曲平胃散處理原代培養(yǎng)小鼠前脂肪細(xì)胞，運(yùn)用形態(tài)學(xué)方法觀察細(xì)胞分化過(guò)程中的形態(tài)變化、運(yùn)用油紅0染色提取法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的脂肪含量、運(yùn)用酶組織化學(xué)提取法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)甘油磷酸脫氫酶(GPDH)的含量，同

2、時(shí)運(yùn)用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)細(xì)胞分化相關(guān)基因C/EBPα、PPARγ、ADD1/SREBP1、Pref-1mRNA的表達(dá)。(2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：進(jìn)行楂曲平胃散防治肥胖作用的研究，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中運(yùn)用稱量方法測(cè)定食量、體重和體脂重量，根據(jù)公式計(jì)算小鼠肥胖指數(shù)和脂肪系數(shù)；運(yùn)用形態(tài)學(xué)方法觀察脂肪細(xì)胞大小及肝、腎形態(tài)變化；運(yùn)用生化方法測(cè)定血脂含量。 結(jié)果：(1)體外實(shí)驗(yàn)：楂曲平胃散作用于細(xì)胞后，從形態(tài)學(xué)角度細(xì)胞內(nèi)脂肪顆粒出現(xiàn)的

3、速度較慢且數(shù)量較少；細(xì)胞內(nèi)脂肪含量和細(xì)胞分化標(biāo)志酶—GPDH的含量均少于陰性對(duì)照組細(xì)胞：同時(shí)C/EBPα mRNA、PPARγ mRNA、ADD1/SREBP1mRNA的表達(dá)量減少，Pref-1 mRNA的表達(dá)量增多。4mg/ml和6mg/ml劑量組效果明顯。(2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：楂曲平胃散用藥后，小鼠食量有一定減少，體重減輕、肥胖指數(shù)下降，體脂重量減輕、脂肪系數(shù)下降，血脂含量降低，脂肪細(xì)胞體積變小。高、中劑量組效果明顯。同時(shí)，各組小鼠肝、腎