探討胰島素-mTOR通路對小鼠白色前脂肪細胞成脂分化的影響.pdf

1、研究表明，胰島素對動物脂肪細胞增殖、分化和糖脂代謝均發(fā)揮重要作用，其對前脂肪細胞成脂分化的調控作用是通過影響mTORC1的活化以及GLUT-4的轉運效率等實現(xiàn)的。然而目前胰島素發(fā)揮調控前脂肪細胞分化的主要途徑尚未明確。基于前期實驗結果，我們猜測mTOR信號通路是胰島素發(fā)揮調控前脂肪細胞成脂分化的主要途徑。為了驗證該假設，體外誘導了Leprdb/db肥胖與WT非肥胖小鼠白色皮下原代脂肪干細胞（sASCs）成脂分化，將其分為4組：單純成脂誘

2、導組、成脂誘導加mTORC1抑制劑（A-769662）組、成脂誘導加GLUT-4抑制劑（細辛脂素）組以及成脂誘導加mTORC1及GLUT-4雙抑制組。使用qPCR以及Western blot技術分別檢測mTOR、GLUT-4和PPARγ2的表達變化特征。
　　本研究主要內容包括：⑴Leprdb/db小鼠sASCs成脂抑制率為（50.32±3.17）％；mTOR基因表達量無顯著變化，而其蛋白磷酸化水平下降了（69.13±4.26）%

3、；GLUT-4基因表達量和蛋白水平均無顯著變化；PPARγ2基因和蛋白水平分別下降了（74.62±4.48）%和（61.52±2.28）%。⑵WT小鼠sASCs成脂抑制率為（60.17±3.45）%；mTOR基因表達量無顯著變化，而其蛋白磷酸化水平下降了（66.22±4.66）%；GLUT-4基因表達量和蛋白水平均無顯著變化；PPARγ2基因和蛋白水平分別下降（68.73±4.87）%和（71.68±2.12）%。⑶Leprdb/db小

4、鼠sASCs成脂抑制率為（30.44±2.21）%；mTOR基因表達量且其蛋白磷酸化水平均無顯著變化；GLUT-4基因表達量上調了（98.26±5.56）%，而其蛋白水平則下降了（70.41±3.57）%；PPARγ2基因和蛋白水平分別下降了（42.44±4.10）%和（46.24±2.99）%。⑷WT小鼠sASCs成脂抑制率為（35.43±2.72）%；mTOR基因表達量及其蛋白磷酸化水平均無顯著變化；GLUT-4基因表達量上調了（8

5、8.14±4.43）%，而其蛋白水平則下降了（64.57±3.23）%；PPARγ2基因和蛋白水平分別下降了（48.62±4.17）%和（49.35±3.54）%。⑸Leprdb/db小鼠sASCs成脂抑制率為（70.41±3.17）%；mTOR基因表達量無顯著變化，但其蛋白磷酸化水平則下降了（72.06±2.28）%；GLUT-4基因表達量上調了（102.31±4.46）%，但其蛋白水平則下降了（71.43±3.68）%；PPARγ2