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1、目的:探討氯沙坦(血管緊張素Ⅱ的1型受體拮抗劑)對(duì)不同系別造血祖細(xì)胞分化的影響效應(yīng),劑量反應(yīng)關(guān)系,最適作用濃度及其分子機(jī)制。 方法:取正常足月剖宮產(chǎn)胎兒臍血,淋巴分離液分離、純化單個(gè)核細(xì)胞,然后加到不同濃度氯沙坦懸浮培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng),繼而轉(zhuǎn)到半固體培養(yǎng)基,對(duì)紅系爆式集落形成單位(BFU-E)和粒-單系集落形成單位(CFU-GM)集落進(jìn)行觀察并計(jì)數(shù),同時(shí)應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)紅系和粒系所占比例。巢式RNA聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢
2、測(cè)血管緊張素Ⅱ1型受體(ATlR)基因的mRNA表達(dá)。 結(jié)果:①紅系祖細(xì)胞在懸浮培養(yǎng)6天、9天時(shí)檢測(cè)到ATlR的表達(dá),氯沙坦可阻斷此效應(yīng)。②氯沙坦抑制紅系集落形成,促進(jìn)粒系集落形成,且呈濃度依賴性,其劑量反應(yīng)關(guān)系用方程表示為Y=100.125-22.496lgx(X:氯沙坦?jié)舛龋籝:紅系集落數(shù));Y=220.594+21.882Igx(X:氯沙坦?jié)舛?;Y:粒系集落數(shù))。③氯沙坦抑制紅系細(xì)胞生成,促進(jìn)粒系細(xì)胞生成,呈濃度依賴性,其
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