氯沙坦對(duì)90%門靜脈結(jié)扎大鼠肝再生的影響.pdf

1、研究背景及目的：目前,廣泛肝切除術(shù)是治療肝臟巨大腫瘤,肝門膽管癌及大腸癌肝轉(zhuǎn)移的首選方法,但術(shù)后殘留肝體積過小導(dǎo)致的致命性肝衰竭限制了其在臨床上的應(yīng)用。為提高手術(shù)的安全性,有學(xué)者應(yīng)用門靜脈栓塞(PVE)作為廣泛肝切除的術(shù)前準(zhǔn)備,并取得良好效果。PVE可使預(yù)保留肝組織(FLR)代償性增生,提高了手術(shù)的安全性,使更多患者獲得手術(shù)治療的機(jī)會(huì)。但即使接受術(shù)前PVE,仍然有5％-36%的患者未能行廣泛肝切除術(shù),其主要原因是PVE后FLR增生不足。

2、
　　 肝再生是一個(gè)由多因子參與、多階段的、精確有序的過程。在動(dòng)物模型中發(fā)現(xiàn)多種細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子對(duì)肝再生起著重要作用,且這些因子在人肝再生過程中也有表達(dá)。其中肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)是目前已知的對(duì)成熟肝細(xì)胞作用最強(qiáng)的增殖刺激因子和促有絲分裂原,在各種肝再生動(dòng)物模型中升高動(dòng)物血清HGF水平將促進(jìn)肝再生。研究表明,血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)是HGF的強(qiáng)抑制劑,在糖尿病及肺纖維化動(dòng)物模型中應(yīng)用AngⅡ受體1(AT1)拮抗劑可提高動(dòng)物血

3、清HGF水平,減輕心血管及肺臟病變。但AT1拮抗劑對(duì)大鼠門靜脈結(jié)扎(PBL)后血清HGF水平及肝再生作用的研究尚未見報(bào)道。
　　 廣泛肝切除術(shù)后發(fā)生急性肝衰竭的另外一個(gè)重要原因是門靜脈壓力急劇升高。由于大量肝組織被切除,供應(yīng)殘余肝組織的門靜脈血流急劇增加,破壞肝竇結(jié)構(gòu),導(dǎo)致肝損傷。同樣,在術(shù)前門靜脈栓塞(PVE)中,門靜脈壓力的升高勢(shì)必破壞該側(cè)肝組織結(jié)構(gòu),使肝再生受損,而降低過高的門靜脈壓力將減輕肝損傷,間接促進(jìn)肝再生。

4、　　 研究表明,氯沙坦作為一種AngⅡ受體拮抗劑,可明顯降低肝硬化門脈高壓患者的門靜脈壓力,減輕患者的臨床癥狀。但氯沙坦對(duì)門靜脈結(jié)扎或栓塞后早期門靜脈壓力及肝再生作用的研究未見報(bào)道,因此,本研究采用90%大鼠PBL模型,探討氯沙坦對(duì)PBL大鼠門靜脈壓力,血清HGF水平及肝再生的影響。
　　 方法：采用雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,90%PBL按本課題前期方法進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)方法如下:

5、>　　 將144只SD大鼠分為假手術(shù)組、單純PBL組(模型組)和PBL+2mg/kg.d氯沙坦干預(yù)組(治療組),分別于術(shù)后0h、6h、12h、24h、48h、72h、120h、168h測(cè)門靜脈壓力,心臟取血檢測(cè)血清ALT、AST水平;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清HGF水平;取大鼠肝臟并計(jì)算未結(jié)扎側(cè)肝重占總肝重比例,HE染色觀察未結(jié)扎側(cè)肝組織的病理學(xué)變化;免疫組化檢測(cè)未結(jié)扎側(cè)肝組織的增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá),計(jì)算PCNA

6、標(biāo)記率。
　　 結(jié)果：①PBL術(shù)后模型組大鼠門靜脈壓力迅速升高,12h達(dá)到峰值,隨后逐漸下降,在術(shù)后6h-72h明顯高于假手術(shù)組(P＜0.01)。與模型組相比,治療組大鼠門靜脈壓力在術(shù)后6h-48h降低明顯(P＜0.05或P＜0.01);②PBL術(shù)后大鼠血清ALT及AST水平迅速升高。與假手術(shù)組相比,模型組ALT水平在術(shù)后12h-72h明顯升高(P＜0.01),而AST值在術(shù)后12h-72h明顯高于假手術(shù)組(P＜0.01)。與模

7、型組相比,治療組ALT值在術(shù)后12h-48h明顯降低(P＜0.01或＜0.05),而AST值則在12h-72h明顯降低(P＜0.01或＜0.05);③PBL術(shù)后模型組及治療組大鼠血清HGF水平明顯升高,并在觀察時(shí)間內(nèi)維持在較高水平,治療組大鼠血清HGF水平在術(shù)后6h-168h明顯高于模型組(P＜0.01);④PBL術(shù)后,結(jié)扎側(cè)肝組織呈漸萎縮,未結(jié)扎側(cè)肝組織則代償性增生,其所占總肝重比例不斷升高。從術(shù)后12h開始,模型組大鼠未結(jié)扎側(cè)肝組織

8、所占百分比明顯高于假手術(shù)組,并隨時(shí)間的推移逐漸增加。治療組未結(jié)扎側(cè)肝組織占總肝重比例在術(shù)后24h-168h明顯高于模型組(P＜0.01);⑤PBL術(shù)后模型組大鼠未結(jié)扎側(cè)肝組織出現(xiàn)細(xì)胞水腫,肝竇明顯擴(kuò)張,術(shù)后72h可見組織細(xì)胞水腫及肝小葉結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,但隨后肝組織結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)正常。治療組術(shù)后24h可見細(xì)胞水腫及肝竇擴(kuò)張,程度較模型輕,肝竇結(jié)構(gòu)破壞不明顯。兩實(shí)驗(yàn)組從術(shù)后24h開始均可見核分裂相;⑥大鼠肝組織PCNA標(biāo)記率的基礎(chǔ)值為5.55%

9、,模型組大鼠肝組織PCNA陽(yáng)性率在術(shù)后明顯升高,并于術(shù)后120h達(dá)到峰值,隨后緩慢下降,在術(shù)后6h-168h明顯高于假手術(shù)組(P＜0.01)。與模型組組相比,治療組大鼠肝組織PCNA標(biāo)記率在術(shù)后12h-72h明顯升高(P＜0.01或＜0.05)。
　　 結(jié)論:①在大鼠90%PBL的模型中,結(jié)扎側(cè)肝組織逐漸萎縮,而未結(jié)扎側(cè)肝組織代償性增生肥大,是一個(gè)可用以研究術(shù)前PVE的肝再生模型。
　　 ②氯沙坦可明顯促進(jìn)90%PBL后