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1、目的:探討缺血預(yù)處理對(duì)70%門靜脈支結(jié)扎大鼠非結(jié)扎側(cè)肝再生的影響,為臨床選擇有效方法促進(jìn)肝再生提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:雄性SD大鼠54只,隨機(jī)分成三組,每組18只。根據(jù)大鼠肝臟的自然分葉,將其分為A、B兩部分,即肝左外葉、中葉為A部分(占大鼠肝臟70%);肝右葉、乳頭葉、三角葉為B部分(占大鼠肝臟30%)。實(shí)驗(yàn)分組:(1)假手術(shù)組(SHAM組):開腹僅游離大鼠A部的門靜脈支,20分鐘后關(guān)腹。(2)70%門靜脈支結(jié)扎組(PVL組)
2、:開腹游離大鼠A部的門靜脈支,20分鐘后結(jié)扎大鼠A部的門靜脈支后關(guān)腹;(3)缺血預(yù)處理+70%門靜脈支結(jié)扎組(IPC+PVL組):開腹后先行A部肝蒂的10min/10min缺血預(yù)處理,再結(jié)扎A部門靜脈支后關(guān)腹。各組大鼠分別于術(shù)后1天、3天、7天再開腹抽取下腔靜脈血4ml并切取肝臟標(biāo)本,以觀測(cè)實(shí)驗(yàn)指標(biāo):(1)在體觀察結(jié)扎側(cè)與非結(jié)扎側(cè)肝臟色澤、大小,對(duì)A、B兩部分肝臟分別稱重并計(jì)算未結(jié)扎側(cè)肝再生比率,即肝再生比率=B部肝重/總肝重;(2)采
3、用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT);采用雙抗體夾心ABC-ELISA法測(cè)定血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)與白介素-6(IL-6)水平;(3)經(jīng)HE切片染色光鏡下觀察未結(jié)扎側(cè)肝組織的形態(tài)學(xué)變化;(4)采用免疫組化法測(cè)定并計(jì)算未結(jié)扎側(cè)肝組織增殖核細(xì)胞抗原(PCNA)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量。
結(jié)果:1、實(shí)驗(yàn)中在體觀察:術(shù)后1天PVL組和IPC+PVL組大鼠A部肝葉缺血后呈暗紅色,灰暗,B部肝葉紅潤(rùn),呈充血狀態(tài),兩組間外觀
4、大體相同,肝葉大小無明顯差異。IPC+PVL組、PVL組大鼠A部肝葉在術(shù)后3天時(shí)略有萎縮,7天時(shí)萎縮明顯,B部3天時(shí)略增大,7天時(shí)增大明顯。SHAM組A部B部肝葉紅潤(rùn),各時(shí)間點(diǎn),肝臟比例無明顯改變。各組大鼠、各時(shí)間點(diǎn)肝再生比率水平從高到低依次為IPC+PVL組、PVL組、SHAM組,但僅術(shù)后3天、7天各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2、各組大鼠、各時(shí)間點(diǎn)血清ALT水平從高到低依次為PVL組、IPC+PVL組,SHAM
5、組,但僅術(shù)后1天各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),血清TNF-α水平從高到低各組依次為PVL組、IPC+PVL組、SHAM組,但僅術(shù)后1天、3天各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),血清IL-6水平從高到低各組依次為IPC+PVL組、PVL組、SHAM組,但僅術(shù)后1天、3天各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3、光鏡下SHAM組大鼠B部肝小葉結(jié)構(gòu)基本正常,IPC+PVL組、PVL組B部肝細(xì)胞水腫變性,少量炎癥細(xì)胞
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