腎衰Ⅰ號(hào)對(duì)單側(cè)輸尿管結(jié)扎大鼠腎組織中Ang-Ⅱ表達(dá)的影響.pdf

1、目的： 探討腎衰Ⅰ號(hào)水煎液對(duì)單側(cè)輸尿管結(jié)扎大鼠腎組織中Ang-Ⅱ表達(dá)的影響及其作用機(jī)制。 方法： 將60只wistar大鼠隨機(jī)分為5組，即模型組、腎衰Ⅰ號(hào)組、貝那普利組、假手術(shù)組和空白組，每組12只．其中模型組、腎衰Ⅰ號(hào)組和貝那普利組：用2％戊巴比妥鈉按30mg/kg腹腔注射麻醉后將大鼠固定、去毛備皮，打開(kāi)腹腔結(jié)扎左側(cè)輸尿管后逐層縫合切口。結(jié)扎日起三天內(nèi)每天肌注青霉素8萬(wàn)單位/只預(yù)防感染。其中模型組用生理鹽水灌胃

2、10ml/(kg·d)，共14天；腎衰Ⅰ號(hào)組：每日用腎Ⅰ衰號(hào)水煎液灌胃一次，劑量為8g/(kg·d)，共14天。貝那普利組：每日灌胃一次，劑量為5mg/(kg·d)，共14天。假手術(shù)組：同樣麻醉后打開(kāi)腹腔但不結(jié)扎輸尿管，并逐層縫合切口，肌注青霉素，生理鹽水灌胃10ml/(kg·d)，共14天。空白組：不作手術(shù)，只肌注青霉素3天和生理鹽水灌胃10ml/(kg·d)，共14天。輸尿管結(jié)扎后第13天開(kāi)始各組按隨機(jī)原則各取10只大鼠分別置于代謝

3、籠中收集24小時(shí)尿液，送湖北省中醫(yī)院同位素室測(cè)尿β2-mG含量；第14天將各組大鼠摘眼球，用抗凝管取血，送湖北省中醫(yī)院檢驗(yàn)科測(cè)血肌酐含量；將大鼠處死，留取梗阻側(cè)腎臟標(biāo)本，置于10％中性甲醛固定液中保存，用以作腎組織切片HE染色和腎組織中Ang-Ⅱ表達(dá)的檢測(cè)。 腎組織切片HE染色后，每組隨機(jī)取10張切片，高倍鏡下(×200)觀察比較各組腎間質(zhì)纖維化程度。結(jié)果采用單盲法評(píng)估，按如下方法評(píng)分：分為-、+、++，+++4個(gè)等級(jí)，分別記0

4、、1、2、3分。(-)為小管間質(zhì)無(wú)病變； (+)為輕度，小管間質(zhì)病變范圍<20％； (++)為中度，病變范圍在20％～40％；(+++)為重度，病變范圍>40％。連續(xù)觀察不重疊的10個(gè)高倍視野，綜合進(jìn)行等級(jí)評(píng)分。 腎組織中Ang-Ⅱ表達(dá)的檢測(cè)中免疫組化采用SABC法，每組隨機(jī)取10張切片，用同濟(jì)千屏影像工程公司HPIAS2000型圖像分析軟件分析，每張切片(×400)光鏡下隨機(jī)采集5個(gè)不重疊視野，棕黃色(Ang-Ⅱ染色區(qū))為陽(yáng)性

5、染色區(qū)。測(cè)量染色區(qū)平均光度值。 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用X±S表示。組間比較采用t檢驗(yàn)。 結(jié)果： 1.尿β2-mG的測(cè)定腎衰Ⅰ號(hào)組和貝那普利治療組尿β2-mG含量較模型組明顯降低(P<0.01)，高于假手術(shù)組和空白組(P<0.01)；腎衰Ⅰ號(hào)和貝那普利治療組之間尿β2-mG含量無(wú)明顯差異(P>0.05)。 2.血肌酐測(cè)定腎衰Ⅰ號(hào)組、貝那普利組與空白組、假手術(shù)組之間無(wú)

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；腎衰Ⅰ號(hào)組、貝那普利組與模型組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 3.病理觀察 HE染色顯示假手術(shù)組和空白組腎小管結(jié)構(gòu)正常；模型組部分腎小管擴(kuò)張，小管皮質(zhì)變薄，部分腎小管萎縮，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯；腎衰Ⅰ號(hào)組和貝那普利組病變較模型組減輕．腎衰Ⅰ號(hào)組與貝那普利組相當(dāng)。 4.腎間質(zhì)纖維化HE染色記分腎衰Ⅰ號(hào)組和貝那普利組記分明顯低于模型組(P<0.01)，高于空白組和假手術(shù)組(P<0.01)；

7、腎衰I號(hào)組和貝那普利組之間記分無(wú)明顯差異(P>0.05)。 5.腎組織中Ang-Ⅱ陽(yáng)性表達(dá)腎衰Ⅰ號(hào)組和貝那普利組平均光度值明顯低于模型組(P<0.01)，高于假手術(shù)組和空白組(P<0.01)；腎衰Ⅰ號(hào)組平均光度值低于貝那普利組(P<0.05)。 結(jié)論： 本研究表明：腎衰Ⅰ號(hào)煎劑具有阻緩腎間質(zhì)纖維化的作用。其作用機(jī)制之一可能是阻緩Ang-Ⅱ在腎問(wèn)質(zhì)中表達(dá)，從而阻緩Ang-Ⅱ在腎纖維化中的作用： ①誘導(dǎo)腎間質(zhì)