VRAC通道在大鼠缺血性神經(jīng)損傷的作用和機制.pdf

1、目的：建立大鼠腦缺血再灌注實驗動物模型。比較應用VRAC抑制劑TAM、NPPB、DCPIB后大鼠神經(jīng)行為學評分、病理形態(tài)學HE染色特點及大腦皮質神經(jīng)元凋亡尼氏染色、天冬半胱酶(caspase-3)免疫熒光染色特點，探討VRAC在大鼠缺血性神經(jīng)損傷的作用和機制，為臨床治療缺血性神經(jīng)損傷提供新的理論依據(jù)。
　　 材料和方法：采用線栓法行大鼠大腦中動脈阻塞（MCAO）誘導大鼠局灶性腦缺血2小時再灌注的腦缺血再灌注模型，實驗分假手術組、

2、MCAO+抑制劑組和MCAO +DMSO組，MCAO+抑制劑組包括TAM組、NPPB組、DCPIB組。MCAO+抑制劑組和MCAO +DMSO組在缺血后分別立即予以立體定向側腦室注射VRAC抑制劑TAM、NPPB、DCPIB及DMSO。建模后24小時開始每天進行神經(jīng)行為學評分。建模后24小時,3天,3周不同時間點處死大鼠，取腦組織標本進行病理學檢查和大腦皮質神經(jīng)元凋亡的尼氏染色、caspase-3免疫熒光染色標記。
　　 結果：

3、MCAO+抑制劑組較MCAO +DMSO組大鼠神經(jīng)行為學評分增高，P＜0.05。MCAO+抑制劑組較MCAO +DMSO組尼氏染色及caspase-3熒光染色統(tǒng)計凋亡細胞數(shù)減少，P＜0.05。HE染色示MCAO+抑制劑組:神經(jīng)細胞、海馬錐體細胞、膠質細胞及毛細血管形態(tài)正常,結構完整,核仁清晰,胞漿無紅染。MCAO+DMSO組神經(jīng)細胞體積明顯縮小,染色加深,胞漿及胞核固縮,胞突消失，可見大量呈篩狀壞死的壞死灶,壞死灶中以膠質細胞為主,間質