NO和JNKs在缺血性腦損傷中相互作用的研究.pdf

1、本研究采用SD大鼠四動脈結(jié)扎全腦缺血模型，研究了全腦缺血中N0和JNKs的相互作用：同時研究了NO的供體SNAP以及nNOS的抑制劑7-NI和iNOS的抑制劑AMT對缺血性腦損傷的保護(hù)作用，為NO在臨床上用來治療缺血性腦損傷方面的疾病，提供了一定的理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。 1．在腦缺血再灌早期NO抑制了JNKs磷酸化 本實驗室的研究已證明腦缺血再灌30分鐘，海馬中JNKs的磷酸化存在一個明顯高峰，再灌6小時c-Jun的磷酸化

2、存在一個高峰。為了研究腦缺血再灌早期NO與JNKs之間的關(guān)系，在實驗我們采用了SD大鼠四動脈結(jié)扎全腦缺血模型，以免疫印跡和免疫沉淀的方法研究了腦缺血再灌后海馬中JNKs和c-Jun的磷酸化情況。為了探討在腦缺血再灌早期內(nèi)源性N0能否抑制JNKs和c-Jun的磷酸化，在缺血前20分鐘給7-NI一次，發(fā)現(xiàn)可以明顯增強腦缺血再灌30分鐘時JNKs的磷酸化及再灌6小時的c-Jun的磷酸化。為了探討在腦缺血再灌早期外源性NO能否抑制JNKs和c-

3、Jun的磷酸化，在缺血前20分鐘給SNAP一次，發(fā)現(xiàn)可以明顯抑制腦缺血再灌30分鐘時JNKs的磷酸化及再灌6小時的c-Jun的磷酸化。結(jié)果提示：在腦缺血再灌早期內(nèi)源性NO和外源性NO都能夠抑制JNKs和c-Jun的磷酸化。 2．在腦缺血再灌晚期NO抑制了JNKs的磷酸化 本實驗室的研究已證明腦缺血再灌3天，海馬中JNKs的磷酸化有一個明顯高峰。為了研究在腦缺血再灌晚期NO對JNKs磷酸化的影響，我們在缺血前20分鐘給7-

4、NI，發(fā)現(xiàn)同在缺血前給AMT一次一樣，對再灌3天時的JNKs的磷酸化沒有影響；在缺血前20分鐘給SNAP一次對再灌3天時的JNKs的磷酸化也沒有影響。結(jié)果提示：內(nèi)源性和外源性NO通過缺血前一次給藥對腦缺血再灌晚期JNKs的磷酸化都沒有影響。于是，在缺血前20分鐘給SNAP一次并且在缺血再灌3天內(nèi)每12小時給藥一次，發(fā)現(xiàn)對再灌3天時的JNKs的磷酸化有抑制作用。結(jié)果提示：腦缺血再灌晚期NO能夠抑制JNKs的磷酸化。 3．SNAP對

5、腦缺血再灌引起的海馬CAl區(qū)神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用 為了探討NO的供體SNAP對腦缺血再灌引起的海馬CAl區(qū)神經(jīng)元損傷是否存在保護(hù)作用，采用焦油紫染色的方法研究了海馬CAl區(qū)神經(jīng)元的存活情況。研究結(jié)果顯示：在缺血前20分鐘給SNAP一次對腦缺血再灌引起的神經(jīng)元損傷沒有保護(hù)作用；如果在缺血前20分鐘給SNAP一次，并且在再灌的3天內(nèi)每12小時給藥一次對海馬CAl區(qū)神經(jīng)元存在很好的保護(hù)作用。結(jié)果提示：連續(xù)7次給NO的供體SNAP對腦缺

6、血再灌引起的海馬CAl區(qū)神經(jīng)元損傷具有保護(hù)作用。 4.7-NI和AMT對腦缺血再灌引起的海馬CAl區(qū)神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用 為了探討nNOS的抑制劑7-NI和iNOS的抑制劑AMT對腦缺血再灌引起的海馬CAl區(qū)神經(jīng)元損傷是否存在保護(hù)作用，采用焦油紫染色的方法研究了海馬CAl區(qū)神經(jīng)元的存活情況。研究結(jié)果顯示：在缺血前20分鐘給7-NI一次對腦缺血再灌引起的神經(jīng)元損傷保護(hù)作用比較明顯；如果在缺血前20分鐘給AMT一次，對腦缺血