細胞因子在翼狀胬肉疾病發(fā)生發(fā)展中的作用.pdf

1、本實驗應(yīng)用ELISA方法來檢測堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)和白細胞介素-6(IL-6)在翼狀胬肉患者血清中的表達，探討細胞因子在翼狀胬肉發(fā)病機制中的作用，為臨床防治此病提供一些理論依據(jù)。 研究方法：選擇大連市第三人民醫(yī)院眼科初發(fā)性翼狀胬肉患者32例(32只眼)，按病變組織局部有無充血肥厚和浸潤，將其分為兩組：(1)靜止期組22例(22只眼)，其中男10例(10只眼)，女12例(12只眼)，年齡46-78歲，平均61.2歲；

2、(2)進行期組10例(10只眼)，其中男4例(4只眼)，女6例(6只眼)，年齡36-75歲，平均56.3歲，所有患者均無其他角、結(jié)膜疾患，確診后均行翼狀胬肉切除+結(jié)膜瓣移植術(shù)。選擇復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者8例(8只眼)，其中男4例(4只眼)，女4例(4只眼)，年齡46-67歲，平均52.6歲，確診后均行翼狀胬肉切除+羊膜移植術(shù)，術(shù)中應(yīng)用絲裂霉素。正常對照組30例(30只眼)，選擇無翼狀胬肉患者。選擇大連市第三人民醫(yī)院眼科初發(fā)性翼狀胬肉患者3例

3、(3只眼)胬肉組織，復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者3例(3只眼)胬肉組織，白內(nèi)障術(shù)后無翼狀胬肉患者3例(3只眼)正常球結(jié)膜。所有研究對象均于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血3ml，采用離心機分離出血清，冷冰儲存?zhèn)溆?。檢測時采用bFGF和IL-6酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒，所有步驟都按照說明書嚴格操作。取初發(fā)性翼狀胬肉患者胬肉組織，復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者胬肉組織，無翼狀胬肉患者的正常球結(jié)膜組織做常規(guī)H-E染色。實驗結(jié)果為計量資料，用t檢驗來分析堿性成纖

4、維細胞生長因子(bFGF)和白細胞介素-6(IL-6)在翼狀胬肉患者血清和正常人血清中表達的差異；用Spearman等級相關(guān)檢驗分析二者間的相關(guān)性；用成組設(shè)計的方差分析來比較初發(fā)性翼狀胬肉靜止期，初發(fā)性翼狀胬肉進行期和復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清中bFGF和IL-6表達的差異。 研究結(jié)果：翼狀胬肉患者血清和正常人血清中均有堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)和白細胞介素-6(IL-6)的表達，但經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗，翼狀胬肉患者組與正常對照組有

5、顯著性差異。bFGF和IL-6表達呈正相關(guān)，即同向表達，說明二者在翼狀胬肉的發(fā)生、發(fā)展及術(shù)后復(fù)發(fā)中起協(xié)同作用。在初發(fā)性翼狀胬肉靜止期，初發(fā)性翼狀胬肉進行期和復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清中bFGF和IL-6表達的比較中，初發(fā)性翼狀胬肉和復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清中的表達相比有顯著性的差異，而在初發(fā)性翼狀胬肉靜止期和進行期患者血清中的表達沒有顯著性差異。正常結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)簡單，基質(zhì)層細胞數(shù)量較少，而翼狀胬肉上皮層可見不同程度增生，基質(zhì)中可有明顯增生和變

6、性兩種表現(xiàn)。以增生為主的翼狀胬肉病變組織內(nèi)膠原纖維排列密集，成纖維細胞增殖活躍，新生血管豐富，尤其在復(fù)發(fā)性翼狀胬肉組織中增殖大量成纖維細胞大量存在，并表現(xiàn)出一定的侵襲性，提示成纖維細胞具備某種轉(zhuǎn)化細胞特性。 結(jié)論：在初發(fā)性翼狀胬肉靜止期、進行期和復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清中均存在bFGF和IL-6的異常表達，與正常人血清相比均具有顯著性差異。在初發(fā)性翼狀胬肉與復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清bFGF和IL-6表達相比有顯著性差異，但初發(fā)性翼狀

7、胬肉的靜止期和進行期患者血清bFGF和IL-6的表達沒有顯著性差異，說明細胞因子在翼狀胬肉的發(fā)生、發(fā)展及術(shù)后復(fù)發(fā)中起著重要作用。bFGF和IL-6這兩種因子在翼狀胬肉患者血清中的表達有明顯的相關(guān)性。翼狀胬肉組織病理切片中可見增生和變性兩種表現(xiàn)。 研究討論：翼狀胬肉是一種慢性增生性眼病。增生的組織肥厚、血管擴張，術(shù)后易復(fù)發(fā)。病理學(xué)研究表明，翼狀胬肉組織中含有大量增生的成纖維細胞，血管的增生和退變，以及球結(jié)膜上皮細胞的異常增殖，其特

8、點與腫瘤組織相似。近年來研究表明：細胞因子在炎癥反應(yīng)及成纖維細胞增生方面起著重要的作用，其在翼狀胬肉發(fā)病機制中的作用越來越引起人們的關(guān)注。它們在正常人血清中也有不同程度的表達，但在翼狀胬肉患者的血清中表達紊亂。某些異常的生物學(xué)行為與這些過度表達的因子所產(chǎn)生的作用有關(guān)。我們通過研究堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)和白細胞介素-6(IL-6)在翼狀胬肉患者血清中的表達，旨在進一步探討其發(fā)病機制。堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)是一種重要

9、的促創(chuàng)傷愈合因子，它不但能促進創(chuàng)面的愈合，而且對血管和神經(jīng)的再生有很強的促進作用。bFGF對成纖維細胞和血管內(nèi)皮細胞具有分化，增殖，遷移及趨化作用。它可以直接刺激內(nèi)皮細胞的有絲分裂和趨化性，在新生血管的形成中起重要作用，而且可促進血管腔的形成。本實驗結(jié)果表明，初發(fā)性及復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清標(biāo)本中有bFGF特異性表達，與正常結(jié)膜組相比具有顯著性差異。提示翼狀胬肉患者血清中bFGF處于較高水平，通過促進翼狀胬肉上皮細胞增殖，并誘導(dǎo)其臨近的上

10、皮下基質(zhì)淺層新生血管形成和成纖維細胞迅速增殖，從而對促進翼狀胬肉增殖和向角膜方向侵襲生長起到一定作用。白細胞介素-6(IL-6)作為一種重要的炎癥細胞因子，具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、參與炎癥反應(yīng)、影響神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)功能，參與了多種疾病的發(fā)生、發(fā)展。本實驗結(jié)果表明，初發(fā)性及復(fù)發(fā)性翼狀胬肉患者血清標(biāo)本中IL-6有特異性表達，與正常對照組相比具有顯著性差異。本實驗術(shù)中切除翼狀胬肉組織并行常規(guī)H-E染色發(fā)現(xiàn)：成纖維細胞增殖活躍，新生血管豐富，大量淋巴細

11、胞、漿細胞浸潤以及肥大細胞反應(yīng)，提示在翼狀胬肉發(fā)病機理中免疫因素的存在。機體的各種細胞因子之間互相影響，互相制約，形成一個非常嚴密、非常協(xié)調(diào)的處于動態(tài)平衡的因子網(wǎng)，以此來保證機體的各種機能和正常的活動，其生物學(xué)特征具有多效性和交疊性。翼狀胬肉組織中有大量的新生血管、纖維母細胞和彈性纖維及膠原纖維增生，并可見大量的淋巴細胞、漿細胞浸潤和肥大細胞反應(yīng)。翼狀胬肉形成的直接原因是大量增生的成纖維細胞和血管的增生與退變，bFGF可促進新生血管的形

12、成，成纖維細胞迅速增殖，加重局部組織炎性反應(yīng)，從而促進IL-6的分泌。IL-6的分泌增強，又進一步促使纖維母細胞、彈性纖維及膠原纖維的增生和變性細胞的浸潤，促進翼狀胬肉的發(fā)生和發(fā)展。正常結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)簡單，基質(zhì)層細胞數(shù)量較少，而翼狀胬肉基質(zhì)中可有明顯增生和變性兩種表現(xiàn)。以增生為主的翼狀胬肉病變內(nèi)膠原纖維排列密集，成纖維細胞增殖活躍，新生血管豐富，尤其在復(fù)發(fā)性翼狀胬肉組織中增殖大量成纖維細胞大量存在，并表現(xiàn)出一定的侵襲性。本實驗的臨床意義在

13、于術(shù)前可以通過ELISA方法檢測患者血清中的細胞因子含量，明確患者是否為翼狀胬肉術(shù)后復(fù)發(fā)的高危人群，以此來指導(dǎo)手術(shù)。術(shù)前滴用含激素類滴眼液，術(shù)中應(yīng)用絲裂霉素等抑制組織生長藥物，或/和行羊膜移植術(shù)，術(shù)后短期內(nèi)仍需應(yīng)用激素類滴眼液、眼膏或注射液及平陽霉素注射液等藥物來降低其復(fù)發(fā)率。但因絲裂霉素及平陽霉素屬于抗腫瘤藥物，對機體有一定的副作用，羊膜價格昂貴，所以上述方法不能在臨床中普遍應(yīng)用，只有那些術(shù)后復(fù)發(fā)的高危人群，我們才謹慎地采用此兩種方法