翼狀胬肉組織中異常脂類代謝的研究.pdf

1、翼狀胬肉作為一種常見的眼科疾病，其發(fā)病機理尚未明確，目前缺乏有效的藥物治療方法，手術(shù)切除是唯一有效的治療方式。深入研究翼狀胬肉的病理改變將有助于揭示翼狀胬肉的病理生理過程，為發(fā)展新的治療方法奠定基礎(chǔ)。近年來，有研究發(fā)現(xiàn)翼狀胬肉組織中存在異常脂類代謝，但是異常脂類代謝在翼狀胬肉發(fā)生發(fā)展中的作用仍不清楚。
　　目的:
　　檢測翼狀胬肉組織中的異常脂類代謝，探究脂類代謝異常在翼狀胬肉發(fā)生發(fā)展過程中的作用。
　　方法:

2、　　本實驗收集35例翼狀胬肉患者的病理組織和5例患者的正常結(jié)膜組織，用于冰凍包埋、石蠟包埋和RNA提取。通過蘇丹黑-B、油紅O染色檢測翼狀胬肉頭部是否存在脂類沉積;通過特定脂類提取實驗、FilipinⅢ染色實驗檢測翼狀胬肉頭部所含主要脂類成分;用免疫組織化學和免疫熒光技術(shù)檢測了APOA1、B、E，CD68和CD45，氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)，兩種氧化型低密度脂蛋白受體:凝集素樣低密度脂蛋白受體1（LOX-1）和磷脂酰絲氨酸和氧

3、化脂蛋白清道夫受體(SR-PSOX/CXCL16)，低密度脂蛋白受體(LDL-R)在翼狀胬肉中的表達;分別提取翼狀胬肉上皮和基質(zhì)的RNA，用實時熒光定量PCR方法檢測凝集素樣低密度脂蛋白受體1（LOX-1），磷脂酰絲氨酸和氧化脂蛋白清道夫受體(SR-PSOX/CXCL16)以及低密度脂蛋白受體(LDL-R)的表達。
　　結(jié)果:
　　蘇丹黑-B和油紅O染色結(jié)果顯示，在翼狀胬肉頭部存在明顯著染區(qū)，特定脂類提取實驗、Filipin

4、Ⅲ染色實驗顯示，脂類沉積區(qū)含有膽固醇酯和游離膽固醇。載脂蛋白A1(APOA1)僅僅在進展期翼狀胬肉中有表達，在靜止期翼狀胬肉和正常結(jié)膜中沒有表達;載脂蛋白E(APO E)在所有翼狀胬肉組織中均有表達，在正常結(jié)膜中僅有微弱表達;載脂蛋白B(APO B)在正常結(jié)膜和翼狀胬肉中均未見表達，而其氧化產(chǎn)物:氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)及其受體凝集素樣低密度脂蛋白受體1(LOX-1)、磷脂酰絲氨酸和氧化脂蛋白清道夫受體(SR-PSOX/CXC

5、L16)在正常結(jié)膜和翼狀胬肉中被檢測到。氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)在翼狀胬肉中表達強于正常結(jié)膜;凝集素樣低密度脂蛋白受體1（LOX-1）在翼狀胬肉上皮中表達比正常結(jié)膜上皮弱，然而在翼狀胬肉基質(zhì)中的表達強于正常結(jié)膜基質(zhì);磷脂酰絲氨酸和氧化脂蛋白清道夫受體(SR-PSOX/CXCL16)表達無明顯差異;翼狀胬肉組織中CD68和CD45陽性區(qū)域與氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)分布有一致性。低密度脂蛋白受體(LDL-R)在翼狀胬肉上