萊菔硫烷對實驗性自身免疫性腦脊髓炎小鼠血腦屏障的保護(hù)作用及機(jī)制的探討.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師( 或指導(dǎo)小組) 的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申‘報的專利等知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究生虢拗導(dǎo)師繇～7 6 二級學(xué)河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文

2、是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：蓋該廁 導(dǎo)師簽章： 飛 叩勿Ⅺ房年；月y 7 日中文摘要萊菔硫烷對實驗性自身免疫性腦脊髓炎小鼠血腦屏障保護(hù)作用及機(jī)制的探討摘 要目的：萊菔硫烷對實驗性自身免疫性腦脊髓炎( e x p e r i m e n t a la u t o i m m u

3、 n ee n c e p h a l o m y e l i t i s ，E A E ) 小鼠血腦屏障保護(hù)作用及機(jī)制探討。初步探討萊菔硫烷對E A E 模型血腦屏障上M M - 9 及c l a u d i n 5 因子的表達(dá)的影響及可能的作用機(jī)制，為進(jìn)一步探討多發(fā)性硬化的發(fā)病機(jī)制及治療方法提供有意義的基礎(chǔ)實驗結(jié)果。方法：將8 4 只體重1 8 ．2 0 9 的8 ．1 0 周雌性C 5 7 B L ／6 小鼠，隨機(jī)分為了正常對照組

4、，E A E 組，萊菔硫烷組( 5 0 m g ／k g ) 和地塞米松組( 0 ．0 7 m g ／k g ) ，每組2 1 只，每組又隨機(jī)分為1 3 天、2 0 天、3 0 天三個亞組，每個亞組7只小鼠。以M O G 3 5 ．5 5 為抗原免疫C 5 7 B L ／6 小鼠建立E A E 模型。用生理鹽水將抗原M O G 3 5 ．5 5 稀釋成為5 m g ／m l 的液體狀態(tài)，然后將完全弗氏佐劑( 其中包含的結(jié)核桿菌H 3 7

5、 R a 的終濃度為4 m g ／m 1 ) 按l ：l 的體積加入并混合均勻，乳化后按每只O ．1 m l 在小鼠脊柱兩側(cè)的皮膚下分四點注射，免疫后的當(dāng)天即第O h 及第4 8 h 腹腔內(nèi)注射5 0 0 n g P T X ( 1 0 0 0 n g ／只) 。自E A E 免疫當(dāng)天( 記為0 天) ，萊菔硫烷組的小鼠給予萊菔硫烷藥物5 0 m g ／k g 每隔一日腹腔注射；給予地塞米松組的每只小鼠地塞米松注射液藥物0 ．0 7 m

6、 g ／k g每隔一日腹腔注射；正常對照組的小鼠及E A E 組的小鼠給予等量的生理鹽水隔日腹腔注射。于動物免疫當(dāng)日及免疫后每日上午8 ：o o 時和下午17 ：O O 時對動物體重、活動狀況、精神狀態(tài)、皮毛光澤度進(jìn)行觀察，并對動物進(jìn)行神經(jīng)功能評分。免疫當(dāng)天記為0 天，取第1 3 天( 發(fā)病前期)第2 0 天( 發(fā)病高峰期) 和第3 0 天( 恢復(fù)期) 三個時間點，比較各組小鼠在不同時間點的發(fā)病率并進(jìn)行神經(jīng)功能評分，并處死小鼠，留取標(biāo)本