notch-1基因在膠質瘤中的作用及對Akt-mTOR通路的調控.pdf

1、福建醫(yī)科大學博士學位論文notch1基因在膠質瘤中的作用及對AktmT通路的調控姓名：趙能江申請學位級別：博士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：鄭志竑20100501凋亡。阻斷Notch1后，U251細胞的cyclinD1、CDK4、Bcl2、MCL1、PARP1蛋白的表達受到抑N(PO05)，P27、caspase3、caspase一9蛋白的表達上調(PO05)，而在過表達NICD的U251細胞其結果則相反。第三部分：Notch1對膠

2、質瘤侵襲和血管發(fā)生的影響及機制研究利用基質膠包被的Transwell小室檢測U251細胞侵襲能力，內皮細胞小管形成實驗觀察瘤細胞培養(yǎng)上清對血管形成的影響，同時用Western—blot法檢測瘤細胞侵襲相關蛋白MMP2、MMP一3、MMP7的表達，RTPCR和ELASA法檢測VEGF的表達，結果顯示：阻斷Notch1可抑制U251細胞的侵襲能力和MMP。2、MMP3的表達，過表達NICD促進腫瘤侵襲能力和侵襲相關蛋白MMP2、MMP7的表

3、達；雖然血管發(fā)生和VEGF的表達未受影響，但是阻斷Notch1能抑制U87細胞VEGFR2的表達。第四部分：Notch1對AktmToR通路調控的研究采用Westernblot法檢測Notch1干擾和NICD過表達的U251細胞中Akt—mTOR通路的主要蛋白TAkt、pAkt、pmTOR、p70S6K、p4EBPl的表達情況，結果顯示：阻斷Notchl能抑UpAkt、pmTOR、p70S6K的表達，過表達NICD的結果則相反。結論阻斷

4、Notch1能抑制膠質瘤生長，促進細胞凋亡和周期阻滯，降低膠質瘤的侵襲能力；促增殖的cyclinD1、CDK4蛋白和抗凋亡的Bcl2、MCL1、PARP1蛋白表達受到抑制，而抑制增殖的P27蛋白和促凋亡的caspase3、caspase9蛋白表達上調；并能抑制AktmTOR通路的pAkt、pmTOR、p70S6K蛋白的表達。因此，Notch1可能通過調控AktmTOR信號及其下游靶點來影響膠質瘤的存活、增殖和侵襲能力。【關鍵詞】膠質瘤N