砷中毒大鼠空腸SP、SS、VIP、CD4、TNF-α免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞的表達(dá)及形態(tài)學(xué)研究.pdf

1、目的：探討慢性砷中毒對大鼠空腸表達(dá)P物質(zhì)（SP）、生長抑素（SS）、血管活性腸肽（VIP）、CD4、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞的影響及與空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)改變的關(guān)系。
　　方法：將60只清潔級 SD大鼠，分為對照組（0.0 mg/kg）、低砷組（0.4mg/kg）、高砷組（10.0 mg/kg），分別自由飲用As2O3與蒸餾水配制的染毒水溶液，濃度分別為0、2、50 mg/L，連續(xù)染毒4個月。采用HE染色、PAS反應(yīng)

2、觀察砷中毒大鼠空腸一般形態(tài)結(jié)構(gòu)變化、免疫組化SABC法顯示SP、SS、VIP、CD4、TNF-α免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞，Biomias圖象分析軟件檢測空腸紋狀緣厚度，SP、SS、CD4、TNF-α免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞數(shù)及平均灰度值；VIP免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞、陽性神經(jīng)纖維面積及平均灰度值。
　　結(jié)果：1.對照組大鼠進(jìn)食飲水正常，毛發(fā)光澤，精神狀態(tài)良好；染砷組量染砷組大鼠毛發(fā)粗糙，精神萎靡，易激惹，體重降低。高、低劑量染砷組大鼠尿砷、血砷濃度(7

3、366.6±1086.50、31.59±9.24)ug/L、(1744.31±300.12、16.58±2.08)ug/L高于對照組(18.97±3.58、5.44±3.36)ug/L，p<0.05，3組對比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.HE染色觀察，染砷組大鼠空腸絨毛結(jié)構(gòu)不規(guī)則；固有層內(nèi)有炎性細(xì)胞浸潤，血管擴(kuò)張。3. PAS反應(yīng)觀察，染砷組紋狀緣不整齊，變薄，油鏡下測量紋狀緣厚度，高、低劑量染砷組（2.06±0.13）、（2.29±0.13）

4、低于對照組（2.83±0.18），p<0.05，3組對比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.免疫組織化學(xué)SABC法顯示：①3組大鼠空腸SP免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)比較，其中高、低劑量組染砷組（4.24±0.33）、（1.85±0.25）個/視野，高于對照組（0.94±0.21）個/視野，p<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3組大鼠免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞灰度值比較，高、低劑量染砷組（118.30±4.58）、（125.13±2.35）低于對照組（133.76±3.6

5、1），p<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②3組大鼠空腸 SS免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)比較，高、低劑量染砷組（3.31±0.41）、（1.83±0.24）個/視野，高于對照組（1.14±0.14）個/視野，p<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3組大鼠免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞灰度值比較，高、低劑量染砷組（124.03±3.94）、（131.28±5.66）低于對照組（137.57±5.49），p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③3組大鼠空腸VIP免疫反應(yīng)陽性細(xì)

6、胞及陽性神經(jīng)纖維面積比較，高、低劑量組染砷組（643.17±54.69）、（252.07±42.96），高于對照組（113.80±24.04），p<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3組大鼠免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞及陽性神經(jīng)纖維平均灰度值比較，高、低劑量染砷組（103.17±4.74）、（114.42±2.59）低于對照組（126.78±3.62），p<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。④3組大鼠空腸CD4免疫反應(yīng)陽性反應(yīng)細(xì)胞計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)，與對照組（9.22±

7、1.30）個/視野比較，低劑量染砷組（14.40±2.33）個/視野增高、高劑量組（5.52±1.44）個/視野降低，p<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3組大鼠CD4免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞灰度值統(tǒng)計(jì)，與對照組（116.60±3.22）比較，低劑量染砷組（105.50±5.29）降低，高劑量染砷組（121.22±3.71）增高，p<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑤3組大鼠空腸TNF-α免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)比較，高、低劑量組染砷組（11.60±1.0

8、0）、（9.09±1.30）個/視野，高于對照組（5.59±0.89）個/視野，p<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3組大鼠免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞灰度值比較，高、低劑量染砷組（102.11±2.32）、（114.256±3.39）低于對照組（127.94±3.96），p<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：1、砷中毒可致大鼠空腸結(jié)構(gòu)損傷；2、砷中毒可致大鼠空腸內(nèi)SP、SS、TNF-α免疫陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)增多，VIP免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞及陽性纖維